研究目的回顾性分析308例次多发性硬化患者的中医四诊信息,探索多发性硬化的中医证候分布规律,并以网络药理学为基础探索中药治疗MS的机制;验证《EDSS电话评分表·中文版》的可行性,探索多发性硬化患者新的随访模式;为中医药治疗多发性硬化的临床及科研工作提供新的思路。研究方法1、回顾性收集308例多发性硬化患者的四诊信息,运用因子分析与聚类分析相结合的方法对调查结果进行分析,探索MS的中医证候分布规律。2、应用网络药理学方法理论,以治疗MS常用的补肾药对“熟地黄-山茱萸”和化湿药对“郁金-石菖蒲”为例,通过“药物活性成分-疾病-治疗靶点”网络图的构建和可视化,靶点蛋白互相作用网络(PPI)的构建,GO功能富集分析与KEGG通路富集分析,寻找中医药治疗MS的关键靶点及通路。3、将纳入的20例RRMS患者用《EDSS电话评分表·中文版》得出的评分与面对面查体获得的EDSS评分进行对比,以组内相关系数、相关性检验以及kappa系数分析两者之间的一致性,验证《EDSS电话评分表·中文版》的可行性,从而探索MS新的随访方式。研究结果:1、通过对28项中医四诊资料进行主成分分析,共获得11个主成分,根据每个中医四诊资料的载荷因子进行筛选,选取因子系数>0.4的四诊资料分配到11个主成分中。然后在主成分分析的结果上进行聚类分析,得出5大类中医证候分布比例,根据专业临床医师对5类中医证候进行辨证,结果为脾肾阳虚(32.46%)、气血两虚(24.03%)、湿热浸淫(21.42%)、肝肾亏虚(12.34%)、湿浊内蕴(9.74%)。2、用Veen软件取药物作用靶点和疾病相关靶点的交集,共获得26个共同靶点。筛选出熟地黄的有效成分2种,山茱萸的有效成分20种,共获得活性成分22个;通过PPI网络图获得25个关键靶点蛋白。通过GO功能富集分析得出条目84个,主要涉及受体活性、离子结合、离子转运活动、蛋白结合以及催化活性等方面;通过KEGG通路富集分析确定了 71条富集通路,涉及细胞凋亡、炎症、血管生成及免疫应答等方面,并且包括了 IL-17信号通路、NF-κB信号通路、HIF-1信号通路、p53信号通路等多种通路。筛选出石菖蒲的有效成分4种,郁金的有效成分15种;通过PPI网络,共获得30个关键靶点蛋白。通过GO功能富集分析,共获得GO条目84个,主要涉及受体活性、细胞凋亡、酶受体激活以及RNA转录等方面。KEGG通路富集分析,共确定了 94条富集通路,涉及细胞凋亡、病毒感染、炎症及免疫应答等方面。3、组内相关系数(ICC)为0.933,置信区间为0.726-0.952,P<0.001,具有统计学意义;Spearman法对进行双变量相关性分析,相关系数(rho)=0.700,P值为0.001,具有统计学意义。kappa=0.467,一致性中等,p值为0.000,具有统计学意义。研究结论1、多发性硬化的基本中医证候共5类,包括脾肾阳虚、气血两虚、湿热浸淫、肝肾亏虚、湿浊内蕴,其中脾肾阳虚所占比例最高,在各主成分中涉及定位于肾的比例为44.81%;而涉及湿邪的比例为31.17%,以湿热为主。由此可见,MS病机为本虚标实,以肾虚为本,湿浊为标,在临床治疗过程中应以补肾为主,同时兼化湿浊,标本兼治。2、“熟地黄-山茱萸”治疗MS的机制是通过多个靶点、诸多功能及多个通路实现的,其中PRKCA、NR3C1、NOS2、CASP8、BAX等关键靶点与MS密切相关,IL-17信号通路和NF-κB信号通路是MS的重要通路,这可能是“熟地黄-山茱萸”治疗MS的机制。“郁金-石菖蒲”治疗MS的关键靶点为C ASP3、MAPK8、REL A、ESR1、CASP8、VC AM1、CASP9等,而IL-17信号通路、NF-κB信号通路、HIF-1信号通路、p53信号通路等通路便是此药对治疗MS关键通路。3、《EDSS电话评分表·中文版》与面对面查体获得的EDSS评分有良好的一致性,能够反应MS患者的残疾程度,电话随访这种新的方式能够满足MS患者远程随访的目的,可以试行推广。