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目的:①优选出复方杨桃的最佳提取工艺条件,研制开发成复方杨桃颗粒(FFYTG);②对FFYTG进行质量研究,建立质量控制标准;③探讨FFYTG对脲链佐菌素诱导的糖尿病小鼠降糖作用及作用机制研究。方法:本课题研究应用现代制药技术对FFYTG的制备工艺及质量标准进行了系统的研究。1.制备工艺研究方法:提取工艺工艺:以干膏得率、2-十二烷基-6-甲氧基-2,5-二烯～(-1),4-环己二酮(DMDD)、葛根素含量的综合评分为指标,选用L9(34)正交试验优选复方杨桃的最佳水提工艺。醇沉工艺:以除杂量、总多糖综合评分为指标,选用L9(34)正交试验优选复方杨桃的最佳醇沉工艺。制剂成型工艺:以颗粒剂成型的关键质量控制指标吸湿率、成型率、溶化性因素为考察指标,选择稀释剂种类、与干膏配比及润湿剂浓度,筛选出合适的稀释剂,最终确定FFYTG的最佳成型工艺。2.质量标准研究方法:本研究建立了杨桃根、葛根、黄芪的薄层色谱鉴别方法,并采用高效液相(HPLC)法测定了 DMDD和葛根素的含量,采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)法测定了黄芪甲苷含量。并对制剂中粒度、水分、溶解性项目进行了检查。3.药效研究方法:采用高糖高脂饲料联合脲链佐菌素(STZ)100 mg/kg腹腔注射的方法构建2型糖尿病模型。72h后测定空腹血糖(FBG),以血糖值≥11.1 mmol/L作为糖尿病模型小鼠。i.g连续给药3周,每周测定小鼠空腹血糖和体重。3周后拔眼球取血,ELISA法测定血清胰岛素(FINS)水平、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF-α)含量;测定小鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、肌酐(Cr)和尿素氮(BUN),测定肾脏指数及肾脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和活性氧簇(ROS)的含量;HE染色观察胰腺和肾脏组织的病理学变化;免疫组化法测定肾脏NF-κB、TGF-β1蛋白表达;结果:1.制备工艺研究结果:复方杨桃最佳水提工艺为:加10倍水,提取2次,每次1.5 h;最佳醇沉工艺为水提液浓缩至相对密度为1.05,醇沉浓度为65%,沉淀18 h。颗粒制备以干膏粉:淀粉:糊精=1:1:0.2为最佳。2.质量标准研究结果:FFYTG中杨桃根、葛根、黄芪在选定的薄层条件下,其样品和标准品在相应位置上显相同颜色的斑点,且阴性对照在相应位置上不显斑点。建立的含量测定方法中DMDD含量在0.82-8.2 μg范围内线性关系良好(R2=0.9990),平均回收率为100.17%,RSD=1.27%。葛根素含量在0.055-0.88 μg范围内线性关系良好(R2-0.9992),平均回收率为100.37%,RSD=1.83%。黄芪甲苷含量在0.4-4 μ g范围内线性关系良好(R2=0.9994),平均回收率为99.56%,RSD=0.76%。3.对糖尿病小鼠降糖作用结果:与正常对照组比较,模型组各时间段空腹血糖均显著升高,与模型组比较,各给药组空腹血糖、血脂、血清Cr、BUN、IL-6、IL-8、TNF-α含量降低,FINS水平有升高趋势,肾匀浆中MDA和ROS含量降低,SOD活性升高。病理结果提示胰腺、肾脏组织形态有所改善。免疫组化结果提示各给药组NF-κB、TGF-β1蛋白表达比模型组低。结论:1.实验结果表明该方颗粒剂提取、除杂、成型工艺方法稳定可行2.建立了FFYTG有效成分的薄层鉴定及含量测定方法,质量标准可行,制剂质量可控。3.FFYTG具有一定的降血糖作用,对肾脏和胰腺有保护作用,可能与其促进胰岛素分泌、降低炎症因子含量、提高小鼠机体内的抗氧化能力和下调肾组织中NF-κB、TGF-β1蛋白表达有关。