凝乳酶优良菌株的选诱及其酶活特性的研究

来源 :湖南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:benn_zhao123
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奶酪是一种营养、方便,风味独特的奶制品,随着人们生活水平的提高,奶酪的生产和消费呈现一种上升趋势。凝乳酶是奶酪生产中使乳液凝固的关键性酶。凝乳酶来源广泛,可从动物、植物和微生物中获得,但由于微生物具有来源广、生产周期短、生产成本低和个体简单易获得理想菌株等优点,正成为新的凝乳酶的重要来源,因而受到很多研究者的青睐。本文主要包括四个方面的内容:(1)从湖南农业大学奶牛场土壤中分离到一株细菌,该菌所产酶的凝乳活力高,蛋白水解活力低,命名为BZ-17,经鉴定为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)中不产毒素的一个变种。(2)以BZ-17为出发菌株,分别用紫外线和亚硝酸进行单独、累积诱变和复合诱变,筛选出一株变异菌株UH-9,该菌株所产酶与出发菌株的相比,凝乳活力提高了279.32%,蛋白水解活力降低了80.88%,经五代遗传稳定性试验表明,该菌株所产酶的活力可保持在稳定的水平。(3)以诱变后的菌株UH-9作为目的菌株,探讨了影响该菌株发酵产酶的各种工艺条件。对培养基中的碳、氮、磷、钙源进行了单因素研究,并进行了正交试验,得出适宜该菌株液体摇瓶发酵的最佳培养基配方为(%):麸皮9,乳清粉1,CaCl2 0.2,NaH2PO40.43,无水Na2CO3 0.1。培养发酵产酶的最佳条件为:种子菌龄为48h,温度为30℃,发酵48h,培养液起始的pH值为7.0,摇床转速为180r/min。(4)酶学性质研究发现:底物pH值为5.5时酶液的凝乳速度最快;在试验的各种pH值中,酶液的凝乳活力在pH6时最稳定;酶液凝乳活力的最适反应温度为45℃;光照对酶的凝乳活力和蛋白水解活力影响都不大;凝乳活力比蛋白水解活力更易受到高温的破坏;Ca2+、Fe2+和Mg2+对凝乳活力有显著地促进作用,Al3+和K+对凝乳活力影响不大;而Cu2+、Zn2+和Na+则对凝乳活力有一定的抑制作用。
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