生防菌长枝木霉T6发酵条件优化、剂型研制及促生防病作用研究

来源 :甘肃农业大学 | 被引量 : 11次 | 上传用户:C263185
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本试验以长枝木霉T6为研究对象,对其生防菌剂进行了研究,筛选了固体培养基质、优化了发酵条件;通过筛选助剂配方,研制出了水分散粒剂,并测定了相关指标及贮存稳定性;同时研究了该制剂的促生防病效果,取得如下结果:1.通过单因素试验对不同发酵条件的长枝木霉T6产孢量进行测定。培养基质筛选结果表明,当m(草炭):m(蛭石):m(牛粪)=1:1:1配制时,产孢量最高,为7.12×108 cfu·g-1;单因素试验表明,长枝木霉T6产孢量的最优发酵条件为含水量60%、接种量30%、透气性9层纱布、温度28℃、p H 5.6,通过试验分析,确定含水量、接种量、透气性为影响产孢量的3个重要因素。2.通过响应面法对不同发酵条件的长枝木霉T6产孢量进行优化和分析,结果表明,最佳发酵条件:含水量64%、接种量27%、透气性9层纱布,在此优化条件下产孢量高达8.80841 cfu·g-1,该试验结果与最优发酵条件下的预测值相吻合,说明回归模型具有较强的适用性。3.通过对长枝木霉T6产孢量和孢子萌发率的测定,优化了培养基配方,通过对助剂类型的筛选,研制出了长枝木霉T.longibrachiatum T6水分散粒剂,并测定了贮存稳定性。结果表明:制备长枝木霉T6水分散粒剂的助剂最适配方(质量分数)为:羧甲基纤维素(紫外保护剂)0.5%,碳酸钙(稳定剂)4%,聚乙烯基吡咯烷酮(PVP,黏结剂)5%,尿素(崩解剂)5%,凹凸棒土(载体)5%及十二烷基硫酸钠(润湿剂)5%。由此配方制备的水分散粒剂中孢子含量为5.6×108 cfu·g-1,悬浮率53%,pH值6.0,水分含量3.5%,湿润时间52 s,且在冷藏温度为(4±2)℃条件下的稳定性显著高于在室温(25)℃。各项试验检测结果均符合国家标准。4.通过对黄瓜、番茄、辣椒、油菜、白菜形态学和生理指标测定,分析和讨论长枝木霉T6水分散粒剂对5种作物的促生作用机理。结果表明,长枝木霉T6水分散粒剂能够显著的提高与作物生长和抗性相关的物质含量和酶活性,尤其是与土壤按1:50的处理,相比对照1,黄瓜株高、基部茎粗、地上鲜重、根系长度、根系鲜重的相对增长率分别为50.07%、73.88%、64.03%、41.45%、77.22%;叶绿素和可溶性蛋白质含量的相对增长率分别为46.16%和50.67%;过氧化物酶以及苯丙氨酸解氨酶两种酶的活性均显著高于对照,相对增长率分别达到7.63%和61.95%,木霉制剂处理的植株粗壮高大,叶片深绿,根系发达,且有明显的增长效果。5.在对植株病害防治试验中发现,长枝木霉T6水分散粒剂对黄瓜白粉病和黄瓜立枯病均具有较好的生防效果,可有效控制病害的蔓延,相对防效均达到53.8%,对辣椒立枯病和油菜根腐病具有明显的防治效果,相对防效分别达到54.8%、43.1%,且该菌剂对供试植株安全无害。施入木霉菌剂的黄瓜,植株不仅粗壮高大,叶片深厚嫩绿,根系发达,具明显增长效果,而且发病程度较轻。
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