【摘 要】
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人乳头瘤病毒(HPV)是一种DNA病毒,主要感染人的皮肤和粘膜,高危型人乳头瘤病毒的持续感染与宫颈癌的发生密切相关,因此建立一种快速简便的检测高危型HPV的方法具有十分重要的
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人乳头瘤病毒(HPV)是一种DNA病毒,主要感染人的皮肤和粘膜,高危型人乳头瘤病毒的持续感染与宫颈癌的发生密切相关,因此建立一种快速简便的检测高危型HPV的方法具有十分重要的意义。本研究的主要内容如下:第一章,简要介绍了人乳头瘤病毒及其与宫颈癌的关系,总结了HPV的检测方法,详细阐述了一些核酸等温扩增方法及其应用,提出了本课题的研究思路及方法。第二章,建立了基于聚合酶链式反应和芯片电泳检测的高危型人乳头瘤病毒HPV16和HPV18的检测方法,分别使用了通用型引物和特异性引物对HPV DNA进行扩增以达到可以检测的含量,扩增产物的DNA测序结果证实了两种扩增的准确性。使用微芯片电泳系统检测PCR产物,实现了DNA样品的快速高通量分析,单个样品检测时间约为2-3分钟,最少样品消耗量约为2μL,灵敏度可以达到102个细胞。第三章,建立了基于环介导等温扩增(LAMP)的可视化高危型人乳头瘤病毒HPV16和HPV18的检测方法,产物可以使用可视化方法检测。与传统检测方法相比,所有反应物事先加好,整个反应过程中不需要打开盖子,结束后无需额外加入荧光染料,避免了可能造成的交叉污染,同时大大缩短了反应时间,提高了反应的准确性,有望用于辅助宫颈癌早期筛查,具有实际应用前景。
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