胃黏膜癌变过程中胃泌素表达变化及其生物学机制

来源 :内蒙古医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sz_ydz
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目的:胃泌素(Gastrin,Gas)是由胃窦黏膜和十二指肠G细胞分泌的多肽类激素,主要生物学功能是刺激胃酸分泌及营养胃肠道黏膜。近年来多项研究表明胃泌素及其衍生物有促进细胞增殖和抑制细胞凋亡的作用,其作用机制仍尚未完全明确。本研究的目的是进一步明确胃泌素在胃癌发生发展过程中的表达变化及其生物学机制。  方法:利用免疫组化方法检测未酰胺化胃泌素(G-18)与酰胺化胃泌素(G-17)分别在非萎缩性胃炎、肠上皮化生型胃黏膜、异型增生胃黏膜以及胃癌中的表达变化;应用MTT方法检测不同浓度大蒜素、小檗碱和奥曲肽在不同时间对胃癌BGC823细胞的生长抑制作用;流式细胞技术检测大蒜素、小檗碱和奥曲肽对胃癌BGC823细胞周期及凋亡情况的影响;利用RT-PCR、Real Time PCR和Western blot等方法明确大蒜素、小檗碱和奥曲肽作用于胃癌BGC823细胞后胃泌素基因及蛋白水平的表达变化。  结果:G-18在非萎缩性胃炎和胃癌中的阳性表达率分别为57%(21/37)和63%(19/30),G-18在胃癌中的表达高于非萎缩性胃炎(P<0.05);G-17在非萎缩性胃炎和胃癌中的阳性表达率分别是23%(9/37)和43%(13/30),G-17在胃癌中的表达高于非萎缩性胃炎(P<0.05)。G-18与G-17比较,在非萎缩性胃炎、肠上皮化生、异型增生、胃癌各组中的表达趋势一致,均有逐渐上调的趋势,且以G-17表达上升趋势更为明显;不同浓度的大蒜素、小檗碱和奥曲肽对胃癌BGC823细胞生长均有抑制作用,抑制作用的强度呈浓度依赖性;10ug/ml大蒜素作用于胃癌BGC823细胞24小时后其细胞抑制率为51%,流式细胞技术检测结果显示大蒜素有促进细胞凋亡作用,并使细胞阻滞于G2/M期。50uM小檗碱作用于胃癌BGC823细胞24小时后其细胞抑制率为42%,流式细胞技术检测结果发现小檗碱促进细胞凋亡的作用较弱,主要使细胞阻滞于G0/G1期。10ug/ml奥曲肽作用于胃癌BGC823细胞24小时后其细胞抑制率为22%,流式细胞技术检测结果显示奥曲肽有明显的促进细胞凋亡的作用;RT-PCR和Real-time PCR结果显示大蒜素作用于胃癌BGC823细胞后胃泌素的表达与对照组相比略降低,小檗碱作用于胃癌BGC823细胞后胃泌素的表达明显降低,奥曲肽作用于胃癌BGC823细胞后胃泌素的表达变化不明显;Western blot结果提示大蒜素、小檗碱和奥曲肽作用于胃癌BGC823细胞后胃泌素蛋白水平表达与基因水平一致。  结论:在胃黏膜病变演化过程中G-18和G-17有表达逐渐上调趋势;胃泌素在胃癌中高表达;大蒜素、小檗碱和奥曲肽有抑制胃癌BGC823细胞增殖的作用;大蒜素、奥曲肽抑制胃癌细胞增殖可能是通过周期阻滞和诱导细胞凋亡实现的;而小檗碱可能是通过影响胃泌素的表达而实现其抑制肿瘤生长的作用的。
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