EPHB4基因启动子区域甲基化情况及其多态性与非小细胞肺癌关系的实验研究

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目的:EPHB4是受体酪氨酸激酶(RTKs)中最大亚家族——Eph家族成员,在很多肿瘤中异常表达,但其在肿瘤发生发展中的功能还不是很清楚。本实验研究非小细胞肺癌(NSCLC)组织中EPHB4蛋白的表达水平,肺癌组织及肺癌患者外周血中EPHB4启动子区域甲基化状态,以及EPHB4基因多态性与非小细胞肺癌易感性之间的关系,揭示EPHB4基因与非小细胞肺癌(NSCLC)发生发展的关系,为NSCLC的治疗和早期诊断提供新的生物学标记。实验设计:采用免疫组化方法检测EPHB4蛋白在肺癌组织中的表达水平,运用甲基化特异性PCR(MSP)和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测肺癌组织,外周血及对照正常组织和正常人血液样本中EPHB4基因启动子区甲基化表型状态以及基因单核甘酸多态性(SNP)。结果:肺癌组织中EPHB4蛋白的表达水平明显低于正常组织。EPHB4基因启动子区域在肺癌组织及肺癌血样本中呈现高甲基化状态,肺癌组织中有(31.6%)发生甲基化,肺癌血样本中为(16.3%),与正常组织及血液样本相比差异有显著性(P <0.05),EPHB4基因启动子区域高甲基化组的生存期明显降低(P<0.05)。EPHB4基因单核苷酸多态性(SNP)与非小细胞肺癌易感性有关(P <0.05)。结论:EPHB4蛋白在肺癌组织中低表达,基因单核苷酸多态性(SNP)可能增加患肺癌的危险,EPHB4基因启动子区域呈现高甲基化状态,表明该基因可能在非小细胞肺癌的肿瘤发生过程中作为抑癌基因起重要作用并且可能与肺腺癌及晚期肺鳞癌血行转移有关。提示EPHB4基因可能有希望成为一个新的非小细胞肺癌(NSCLC)的生物学标记。
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