本课题属于“构建高产CoQ10大肠杆菌基因工程菌”项目子课题。　　 辅酶Q作为生物组织细胞内线粒体呼吸链中的递氢体,在学术与应用领域都有着重要的价值。ubiA基因在大肠杆菌CoQ生物合成途径中编码4-羟苯甲酸转移酶,是CoQ生物合成途径的限速步骤。本实验室在前期工作中构建了大肠杆菌MC4100的ubiA灭活株pMAK-ubiA/MDA12,利用其高温下不能存活的特性建立了ubiA突变子筛选模型并进行了ubiA的全基因改组。本课题在这些工作的基础上尝试建立只对ubiA基因中文献报道的活性区域进行DNA改组的模型,并优化了从构建突变文库到筛选突变子这一过程中影响结果的一系列因素。同时对皂化法提取COQ的回流时间也进行了优化,使CoQ产量最终检测结果的相对误差有了显著降低。对于改组得到的ubiA基因,本课题鉴定了其回补能力,同时测定了对应菌株的CoQ产量。经过两轮筛选,第一轮基因改组实验最终得到9个具备ubiA活性的菌株,共8种序列,其中2种序列造成CoQ产量下降,3种序列出现CoQ产量上升,其余3种序列其对应的CoQ产量未呈现明显变化。