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竹类资源丰富,研究和开发利用的空间巨大。有关竹子开花生理过程的研究一定程度上受取样困难和相关基因组信息缺乏的限制,因此研究竹子开花中的关键因子是非常必要的。植物体内SEPALLATA3蛋白(简称SEP3)与其他蛋白或元件组装成多聚体复合物,SEP3蛋白自身或与其它蛋白是如何组装的,形成什么样的空间复合物尚不清楚,但其在植物开花生长中具有非常重要的作用。本实验构建了绿竹和拟南芥SEP3蛋白的原核表达载体,纯化可溶性SEP3蛋白并进行体外功能结构试验,探究SEP3蛋白结构与功能关系及多聚体的形成机制。主要结果如下:1.成功构建得到不同结构域的原核表达SEP3蛋白载体,以pET15b为表达载体,Rosetta为宿主表达细菌,20℃条件下1%IPTG诱导15h,纯化得到了高纯度的拟南芥和绿竹的M domain SEP3蛋白、IK domain SEP3蛋白和SEP3包涵体蛋白。2.通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱MALDI TOF MS指纹图谱分析,Mascot程序将得到的多肽片段与SwissProt数据库信息比对,验证原核表达蛋白为SEP3蛋白。3.SEP3蛋白N端具有与DNA特异性结合的M区,本实验将纯化得到的M domain SEP3蛋白与启动子特异序列CArG box DNA结合,通过凝胶阻滞实验验证了SEP3蛋白具有结合DNA的活性。4.分析凝胶过滤层析峰图显示绿竹和拟南芥SEP3蛋白具有多聚性,体外戊二醛交联和酵母双杂交试验表明SEP3蛋白以二聚体为基本作用元件存在,SEP3蛋白均一性不高,主要以26聚体存在,并且同源或异源互作与K结构域具有密切关系。拟南芥和绿竹分别属于双子叶植物和单子叶植物,AtSEP3和BoSEP3不仅序列高度同源,且蛋白结构也具有很高的一致性,本研究对于植物成花机制研究具有参考意义。