论文部分内容阅读
【目的】肺癌是全身各种肿瘤中发病率与死亡率最高的恶性肿瘤,男性位居第一,女性仅次于乳腺癌位居第二,严重威胁人们的健康与生命。随着肿瘤相关分子机制研究的深入以及分子靶向药物的应用,以基因为导向的个体化多学科综合治疗将扮演着越来越重要的角色。微小RNA(miRNA)是一类长约22个核苷酸的保守非编码小分子RNA,通过调控目标基因表达,影响肿瘤细胞的增殖、分化及凋亡。本研究旨在分析miR-18a和miR-328在肺腺癌A549细胞中的表达,探讨下调miR-18a或miR-328的表达对其侵袭和迁移能力的影响。【方法】(1)运用实时荧光定量PCR法检测肺腺癌A549细胞和正常支气管上皮BEAS-2B细胞中miR-18a和miR-328的相对表达量。(2)通过获取人miR-18a、miR-328序列,设计并合成其inhibitor序列及NC序列,应用脂质体转染技术,以下调miR-18a或miR-328的表达,从而建立低表达miR-18a或miR-328的A549细胞模型。(3)进一步采用Transwell TM侵袭和迁移实验分别检测各组A549细胞侵袭和迁移能力的变化。【结果】(1)与正常支气管上皮BEAS-2B细胞相比,肺腺癌A549细胞中miR-18a和miR-328均呈高表达,差异有统计学意义(均P<0.05)。(2)与空白对照组和阴性对照组相比,肺腺癌A549细胞中,转染miR-18a inhibitor组的miR-18a的表达明显降低,差异有统计学意义(均P<0.05);转染miR-328 inhibitor组的miR-328的表达同样明显降低,差异有统计学意义(均P<0.05)。(3)Transwell TM侵袭实验检测结果显示,与空白对照组和阴性对照组相比,转染miR-18a inhibitor组的A549细胞侵袭能力明显降低,差异有统计学意义(均P<0.01);转染miR-328 inhibitor组的A549细胞侵袭能力明显降低,差异有统计学意义(均P<0.01)。(4)与空白对照组和阴性对照组相比,转染miR-18a inhibitor组的A549细胞与转染miR-328 inhibitor组的A549细胞迁移能力均明显降低,差异有统计学意义(均P<0.01)。【结论】在A549细胞中miR-18a和miR-328均呈高表达,下调A549细胞miR-18a或miR-328的表达水平均可有效抑制肿瘤细胞的侵袭、迁移,miR-18a和miR-328可能因其有效调控肿瘤细胞的侵袭、转移能力,从而成为肺恶性肿瘤治疗的一个新靶点。