IL-3Rα异构体SP1、SP2在急性髓系白血病细胞的表达及其对预后的影响

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目的:研究初治急性髓系白血病患者白血病细胞hIL-3Rα异构体SP1、SP2表达水平与其临床特征及血清IL-3水平的相关性;并在体外培养条件下,研究SP1的特异性抗体7G3对白血病原代细胞增殖、分化的影响。方法:1.用荧光定量RT-PCR检测77例急性髓系白血病患者骨髓或外周血未分选的单个核细胞和11例经分选的CD34+白血病细胞hIL-3RαSP1、SP2转录水平的相对表达量,同时以14例正常人脐带血CD34+细胞作为对照;2. WesternBlot鉴定SP1在蛋白水平的表达;3. ELISA法检测急性髓系白血病患者血清IL-3浓度,并以14例正常人血清为对照;4.建立原代白血病细胞体外培养体系,应用Brdu法及瑞氏吉姆萨染色法检测SP1的特异性抗体7G3对白血病原代细胞增殖、分化情况;5.采用SPSS17.0软件进行统计学分析,两组间相关性分析采用spearman秩相关分析,多组间相关性分析采用Kruskal-Waillis分析;缓解率分析采用χ2检验;总生存率分析采用Kaplan and Meier分析,并用Log-rank检验;多变量分析采用降维分析-最优尺度分析。P<0.05认为差别具有统计学意义。结果:1. AML CD34+白血病细胞群SP1的表达水平比正常CD34+细胞群高(P=0.0109),亦高于未分选的白血病细胞群(P=0.0243),而SP2无此结果。2. AML SP1的高表达与高白细胞数、高幼稚细胞比例相关,且高表达SP1的AML(non-APL)患者比低表达者具有更低的总生存率(P=0.0307),AML白血病细胞SP2的表达与白细胞数(r=0.235,P=0.039)、幼稚细胞比例(r=0.228,P=0.047)呈正相关,但未发现与总生存率有明显相关。3.7G3阻断hIL-3RαSP1后,对外源性IL-3反应性较好的原代白血病细胞增殖均出现不同程度的下降,而对外源性IL-3反应性较差的细胞增殖无明显改变。尚未发现阻断SP1后细胞形态学发生明显变化。4.AML细胞体外自身增殖能力与对外源性IL-3的反应性存在非线性相关,即在体外自身增殖能力强的细胞对外源性IL-3的反应性较低,而细胞体外自身增殖能力弱时,与对外源性IL-3的反应性无明显相关;患者血清IL-3含量与CR存在的非线性相关,即在血清IL-3超过正常群体中位值的样本中,IL-3含量高的患者CR率较低,而低于正常中位值的样本中,血清IL-3含量与患者CR率无明显相关;AML细胞体外自身增殖能力与患者的缓解率存在非线性相关,即在白血病细胞体外自身增殖能力超过群体中位值的样本中,白血病细胞自身增殖能力较高的患者CR率较低,而自身增殖能力低于群体中位值的样本中,白血病自身增殖能力与患者CR率无明显相关。结论:AML CD34+白血病群SP1的表达水平较正常CD34+细胞高,亦高于未分选AML白血病细胞,并可作为提示患者预后的指标。
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