分子印迹技术在兽药四环素类抗生素残留检测中的应用研究

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分子印迹聚合物(MIP)是通过化学手段人工合成的高分子仿生材料,它是将功能单体在模板分子(目标分子,又称印迹分子)的存在下交联聚合,然后洗脱除去模板分子。这样制得的聚合物,在立体空穴和作用位点上与模板分子具有互补的结构,又具有模板分子可回收重复使用的优点,因此在分子识别中有着特殊的选择性和良好的应用前景。本论文以四环素分子为模板分子,通过本体聚合、沉淀聚合技术合成了相应的分子印迹聚合物,并把这些聚合物作为固相萃取吸附剂应用于动物源食品的样品前处理中,最后借助高效液相色谱分析方法完成了对猪肉和牛奶中四环素类抗生素的富集分离和检测。主要工作及主要研究结论如下:第一章:本章首先综述了分子印迹的发展史、分子印迹的基本原理以及制备方法,然后详述了影响分子印迹聚合物特异性吸附作用的关键因素,评价了分子印迹聚合物分子识别性能的各种表征方法,最后综述了分子印迹聚合物在四环素类抗生素分离富集方面的实际应用,指出了分子印迹技术的现存问题,并展望了分子印迹技术发展趋势。第二章:以四环素为模板分子,甲基丙烯酸为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸甲酯为交联剂,采用本体聚合方法合成四环素分子印迹聚合物(TC-MIPs),并对其进行了性能表征。选择性吸附试验表明该分子印迹材料对与模板分子结构相似的三种四环素类抗生素具有特异性吸附效果,本实验还通过Scatchard方法分析了分子印迹材料的吸附机理。结果表明:与NIPs不同的是,在TC-MIPs中存在着两类不同的客体键合点。本实验还采用沉淀聚合方法合成了TC-MIPs,并与本体聚合法合成的聚合物进行了对比。SEM扫描结果表明:本体聚合合成的块状聚合物粒度不均一、孔结构不规则,而沉淀聚合法合成的微球状聚合物具有单分散好、形状规则、吸附能力强等优点。本实验还详细研究了包括功能单体的种类与用量、交联剂的种类与用量、聚合温度、致孔剂以及模板分子与功能单体、交联剂的摩尔比等影响聚合反应的各种因素。第三章:用聚合物作固相萃取的吸附剂,结合高效液相色谱技术,对动物源食品猪肉和牛奶中四环素类抗生素进行富集、分离与定量检测。详细优化了分子印迹固相萃取的操作条件:用10 mL的水作为淋洗液,用8 mL的甲醇溶液作为洗脱液,用2.0 mL min-1的速度上样30 mL。液相色谱条件为:以CH3OH/缓冲液(30:70 V/V)(缓冲液组成:0.1 M丙二酸,0.05 M MgCl2溶液,用氨水调pH值6.5)为液相色谱流动相,通过检测355 nm处紫外吸收值确定其实际样品中的含量。结果表明,分子印迹固相萃取-高效液相色谱法可以用来直接富集、分离、检测猪肉和牛奶中的四环素类抗生素。
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