目的:观察外源性兔骨髓间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)在活体兔椎间盘微环境中的存活状态。方法:(1)体外培养经基因转染红色荧光标记的兔骨髓间充质干细胞,选取健康新西兰大白兔24只,待骨髓间充质干细胞活性状态最佳时,利用显微注射方法将细胞注入兔腰椎间盘髓核内。(2)于术后1天、7天、14天、30天、60天,手术取出椎间盘,行病理学切片,在荧光显微镜下观察外源性骨髓间充质干细胞的存活状况,利用细胞内红色荧光蛋白的消失与否来判定细胞是否存活。计数各期荧光细胞的数量,并进行对比,确定细胞数量的增减趋势。结果:骨髓间充质干细胞注射术后各时间段均可观察到椎间盘髓核内红色荧光细胞存在,14天时荧光较1天及7天时有所减弱,60天时椎间盘切片细胞荧光明显,且细胞较前更加散在分布。30天时荧光细胞数量较1天时有所增加(p=0.021),60天时荧光细胞数量较1天时有所增加(p=0.000)结论:外源性骨髓间充质干细胞在活体兔椎间盘内,至注射后60天观察时,仍可见细胞发出的红色荧光,从而推断MSCs在此周期内存活。