【摘 要】
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茶树[Camellia sinensis（L.）O.Ktze.]是我国一种古老而重要的经济作物,但是茶树基因组的数据库还不够完善,许多茶树基因并未成功克隆以及鉴定其生物学功能。而模式植物的基因组及功能的研究已经日趋完善,随着多种植物高密度分子标记、连锁图谱的构建、大片段DNA克隆系统的建立,测序技术和基因遗传转化技术的发展,基因克隆技术发展的速度和效率正在不断提高,使人们能够克隆得到更多未知基因,
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茶树[Camellia sinensis（L.）O.Ktze.]是我国一种古老而重要的经济作物,但是茶树基因组的数据库还不够完善,许多茶树基因并未成功克隆以及鉴定其生物学功能。而模式植物的基因组及功能的研究已经日趋完善,随着多种植物高密度分子标记、连锁图谱的构建、大片段DNA克隆系统的建立,测序技术和基因遗传转化技术的发展,基因克隆技术发展的速度和效率正在不断提高,使人们能够克隆得到更多未知基因,越来越多的优良基因被克隆得到并应用到生产实践中去,因此本研究对克隆茶树新基因并鉴定其功能,对今后指导培育茶树优良新品种具有重要意义。本论文利用茶树的转录组数据通过同源序列克隆法获得茶树CsGPX1和CsMYB81基因序列,构建两者的植物过表达载体;对这两个基因进行了生物信息学分析预测其可能的生物学功能;运用农杆菌介导法,将CsGPX1转导至烟草中进行稳定表达,并比较野生型烟草与转基因烟草抗旱性能的差异,验证CsGPX1功能;初步探讨了赤霉素处理对茶树CsMYB81基因表达的影响。本文主要研究结果如下:对茶树CsGPX1基因生物信息学分析结果证明CsGPX1属于谷胱甘肽过氧化物酶,属于GPX家族。干旱胁迫处理结果显示,过表达CsGPX1烟草株系抗旱性强于野生型植株。GPX酶活性测定结果表明,转基因植株的GPX酶活性高于野生型植株。以上研究结果表明,过表达CsGPX1可提高转基因烟草的耐旱能力,说明CsGPX1可能与茶树的耐旱性能相关。本研究有利于完善茶树基因库,明确茶树CsGPX1基因功能;为今后选育耐旱的茶树品种奠定理论基础。对茶树CsMYB81基因生物信息学分析结果显示,证实CsMYB81编码的氨基酸属于MYB家族蛋白,推测CsMYB81基因可能与赤霉素响应机制有关。根据荧光定量PCR实验结果显示CsMYB81基因在茶树茎、叶、茶籽、花瓣和花粉部位均有表达,且在茶叶和茶籽中的相对表达量较高。对茶树叶片进行赤霉素处理,实验结果显示CsMYB81基因参与赤霉素响应机制。该研究结果为今后赤霉素调控茶树CsMYB81基因的分子机制奠定基础。
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