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研究背景氧化应激可以引起内皮细胞功能障碍,并导致炎症反应及血管病变,其致病机制是致线粒体功能障碍、细胞损伤及凋亡。有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)在调节氧化应激损伤后凋亡过程中起到重要作用。c-Jun氨基末端激酶(c-Jun-N-terminal kinase, JNK)属于MAPK家族成员,调节细胞的生长、分化、应激与死亡。JNK通路的激活与细胞凋亡有密切关系。丙泊酚(Propofol,PPF)是临床常用的静脉麻醉药,其化学结构类似于内源性氧自由基清除剂维生素E,因此具有抗氧化活性。已有实验证实PPF具有清除活性氧(ROS)及抗凋亡的作用,然而其有关浓度报道不一,作用机制是否与JNK信号通路有关尚不详。因此,本研究探讨不同浓度PPF预处理对人脐静脉内皮细胞(]human umbilical vein endothelial cells, HUVEC s)氧化应激损伤的防治作用,评价其与JNK信号通路的关系。第一部分PPF防治H202诱导的HUVECs氧化应激损伤的作用目的探讨不同浓度PPF预处理对HUVECs氧化应激损伤的防治作用。方法体外培养的HUVECs分为8组：对照组(Cl组)细胞常规培养；DMSO对照组(C2组)细胞培养基中加入DMSO(终浓度0.05%)；PPF组(P组)培养基中加入PPF(终浓度50μmol/L)处理4h；H202处理组(H组)培养基中加入H202(终浓度400μmol／L)处理4h；超低浓度PPF组(P1+H组)以1μmol/LPPF预处理HUVECs 30min后加入H2O2400μmol/L处理4h；余在PI+H组基础上增加预处理PPF浓度分别为5μmol/L低浓度PPF组(P5+H组)、25μmol/L中等浓度PPF组(P25+H组)和50μmol/L高浓度PPF组(P50+H组)。各组细胞培养后,用CCK-8法测定细胞存活率,用流式细胞仪及荧光显微镜检测ROS浓度。结果 与C1组比较,H组细胞存活率明显降低,ROS水平明显增加(P<0.05)。C2组、P组与Cl组差异无统计学意义。与H组比较,PPF25μmol/L和50μmol/L浓度组预处理后细胞存活率升高,ROS产生明显降低(P<0.05)。结论25μmol/L和50μmol/L浓度的PPF预处理可减轻氧化应激对HUVECs的损伤。第二部分PPF对H202诱导HUVECs凋亡及JNK信号通路的影响目的探讨PPF对HUVECs氧化应激损伤的保护作用是否是通过抑制.TNK通路、调节凋亡相关蛋白实现的。方法体外培养的HUVECs分为8组：对照组(C1组)细胞常规培养；DMSO对照组(C2组)细胞培养基中加入DMSO(终浓度0.05%)；PPF组(P组)培养基中加入PPF(终浓度50μmol /L)处理4h；H202处理组(H组)培养基中加入H202 (终浓度400μmol/L)处理4h：超低浓度PPF组(P1+H组)以1μmol/LPPF预处理HUVECs 30min后加入H2O2400μmol/L处理4h；余在P1+H组基础上增加预处理PPF浓度分别为5μmol/L氐浓度PPF组(P5+H组)、25μmol/L中等浓度PPF组(P25+H组)和50μmol/L高浓度PPF组(P50+H组)。各组细胞培养后,用流式细胞仪检测细胞凋亡率,用western blot法检测各组细胞Bax、Bcl-2、caspase-3、JNK及p-JNK等的蛋白表达。结果与C1组比较,H组细胞凋亡率升高,p-JNK表达上调,Bax/Bcl-2比值升高,caspase-3表达升高(P<0.05)。C2组、P组与C1组差异无统计学意义。与H组比较,PPF5μmol/L、25μmol/L和50μmol/L浓度组预处理后细胞凋亡率降低、p-JNK表达F调,Bax/Bcl-2比值降低、caspase-3表达降低(P<0.05)。结论5μmol/L、25μmol/L和50μmol/L浓度的PPF预处理对HUVECs的保护作用与抑制JNK信号通路、调节凋亡蛋白表达有关。