鲁米诺发光体系在生物药物和食品分析中的应用

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本学位论文为鲁米诺发光体系在生物药物和食品分析中的应用,它包括综述和研究报告两部分。第一部分综述在这部分,主要以2000~2007年有关化学发光分析的文献为基础,结合本人的研究工作,简要综述了鲁米诺-过氧化氢、鲁米诺-铁氰化钾、鲁米诺-碘化物、鲁米诺-溶解氧、鲁米诺-高锰酸钾等化学发光体系的反应机理以及应用。第二部分研究报告发光试剂有很多种,其中鲁米诺是最常见的化学发光试剂之一。本研究工作主要以鲁米诺为发光试剂,过氧化氢、高碘酸钾、铁氰化钾、溶解氧为氧化剂的基础上,采用流动注射技术,自行设计了化学发光实验装置,完成了对罗红霉素、多巴胺、克林霉素、苏丹Ⅰ、山萘酚等的测定。1.在药物分析中的应用(1)罗红霉素作为一种安全而有效的抗生素,被广泛应用于一些性传播疾病、上下呼吸道感染和哮喘、齿龈感染如齿龈炎、胃肠道感染等。基于罗红霉素能够增强luminol-H2O2化学发光强度这一现象,建立了测定罗红霉素的简单、灵敏、快速的流动注射化学发光法。在优化条件下,测定罗红霉素的线性范围为1.0-1000pg mL-1,相对标准偏差少于5%,测定时的采样频率达到每小时120次。该方法已被成功的应用于人体尿液中罗红霉素含量的监测,在口服两小时后,它的排出量达到最大值,十二小时内的代谢率为4.6%。本研究工作发表在Curr.Drug Metab.,2006,7,389-395。(2)多巴胺是一种神经传递物质。人体中多巴胺含量的改变可以导致一些重要疾病如神经分裂症和帕金森氏症。本文基于多巴胺对luminol-IO4-和luminol-Fe(CN)63-化学发光体系的抑制作用为基础,建立了两种化学发光测定多巴胺的新方法。实验表明发光强度的降低值与样品浓度的对数呈线性关系,检测范围分别为1.0-300ng mL-1和0.1-10ng mL-1;检出限为0.3ng mL-1和0.04ng mL-1;本法成功测定了药物制剂和人血清中多巴胺的含量。本研究工作已发表在Can.J.Anal.Sci.& Spect.,2006,51,59-66;西北大学学报,2005,35,108-109。(3)克林霉素为一种抗菌素,适用于葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎球菌等引起的皮肤软组织感染、上下呼吸道感染、急慢性骨髓炎等。在luminol-H2O2体系中,克林霉素能够显著增强该体系的发光强度,克林霉素的浓度范围从1.0pg mL-1到1.0ngmL-1,相对标准偏差少于3.0%(n=5),检出限为0.3pg mL-1(3σ)。当流速为2.0mL min-1时,对克林霉素的测定能在0.5分钟内完成。该方法被成功的应用于克林霉素胶囊、尿样和血样的测定,且回收率为86.2-108.8%。本研究工作已发表在中华医药杂志,2005,6,22-24。2.在食品分析中的应用苏丹Ⅰ是一种红色的偶氮染料,也是一种工业合成染色剂,用于为溶剂、油、蜡、汽油增色以及鞋、地板等的增光。依据IARC,苏丹(Ⅰ-Ⅳ)染料被列入第三类致癌物质中,这是因为它能诱发一些动物的肝癌和膀胱癌,并且全球食品法案中都禁止苏丹Ⅰ添加到食品中。基于苏丹Ⅰ能够增敏luminol-H2O2化学发光反应,而建立了测定苏丹Ⅰ的新方法。在优化条件下,对苏丹Ⅰ检测的线性范围为10pg mL-1-7ng mL-1,检出限为3pg mL-1(3σ),定量限为7.5pg mL-1。单次测定所需要的时间为1分钟,相对标准偏差小于5.0%。本方法已经成功地应用于问题辣椒酱中苏丹Ⅰ的测定,并用高效液相色谱进行了对照实验,结果满意。本研究工作发表在J.Agr.& Food Chem.,2007,55,614-617。3.在生物分析中的应用山萘酚,又名黄茋甙元和山萘黄素,是一种类黄酮,广泛存在于天然植物中,如苹果、洋葱、韭葱、柑橘类的植物、葡萄和银杏中。山柰酚具有抗癌、抑制生育、抗癫痫、抗炎、抗氧化、解痉、抗溃疡、利胆利尿、止咳的作用。本文测定了由桃耳七真菌发酵产生的山萘酚,以山萘酚对luminol-H2O2和luminol-dissolved oxygen化学发光体系的增强作用为基础,建立了两种灵敏的测定山萘酚的方法。实验发现,山萘酚的线性浓度范围分别为7-1000pg mL-1和10-3000pg mL-1,检出限分别为3和3.5pgmL-1,相对标准偏差小于3.0%和4.0%,该方法成功的应用于纯化和未纯化的桃耳七真菌发酵液和人体尿液中山萘酚的测定。
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