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背景和目的宫颈癌(cervical cancer)是严重危害女性健康的常见恶性肿瘤之一。凋亡(apoptosis)减少是恶性肿瘤重要的生物学特性之一。因此,探讨诱导肿瘤细胞凋亡的方法对于恶性肿瘤的治疗具有重要意义。黄芪是常用的中药之一,其主要活性成分是黄芪多糖(asragulus polysacharin, APS)。研究显示,APS对多种肿瘤细胞的生长具有抑制作用,但尚未见APS对人宫颈癌C-33A细胞凋亡影响的相关报道。本研究拟探索APS对C-33A细胞凋亡的影响及机制,以期为APS在宫颈癌治疗中的应用提供实验依据。方法1.制备APS并定量。2.课题组另外的研究对APS的用药浓度和作用时间进行了探索,根据预实验的结果,本研究所有实验中均以200μg/mL的APS诱导48h的C-33A细胞为实验组,以不加药的C-33A细胞为对照组。3.通过脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)染色和Annexin V-FITC/PI结合流式细胞术检测APS处理前后C-33A细胞凋亡情况。4.通过Western blotting方法检测APS处理前后B细胞淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2, Bcl-2)、超大B细胞淋巴细胞瘤(B-cell lymphoma-extra large, Bcl-XL)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2associated X protein, Bax)、第二线粒体来源的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶激活剂(second mitochondria-derived activatorof caspase, Smac)和凋亡抑制蛋白-1(inhibitor of apoptosis protein-1, IAP-1)等细胞凋亡相关基因表达的变化。结果1.提取的APS的浓度为51.514mg/mL。2.Annexin V-FITC/PI结合流式细胞术检测细胞凋亡结果显示：与对照组相比,APS组C-33A细胞凋亡均数显著增加(P<0.01),对照组和APS组凋亡细胞百分比分别为：0.847%和31.673%。3.TUNEL染色检测细胞凋亡结果显示：APS组C-33A细胞凋亡显著高于对照组(P<0.01)。4. Western blotting结果显示：与对照组相比,APS组C-33A细胞中Bcl-2和IAP-1的表达显著降低(P<0.01), Bax和Smac的表达显著增加(P<0.01),而Bcl-XL的表达差异无显著性(P>0.05)。结论1.APS能诱导人宫颈癌C-33A细胞凋亡。2.抗凋亡基因Bcl-2和IAP-1表达下调及促凋亡基因Bax和Smac表达上调可能在APS诱导宫颈癌C-33A细胞凋亡中具有重要作用。