【摘 要】
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目的:目前,LONP1通过调控PI3K/AKT/m TOR/4e BP1信号通路参与卵巢癌的发生发展及其机制尚未见报道。本研究旨在通过探讨LONP1通过PI3K/AKT/m TOR/4e BP1信号通路对卵巢癌细胞增殖的影响,抑制LONP1的表达可以诱导卵巢癌细胞迁移和侵袭发生改变和细胞周期发生阻滞,引起卵巢癌细胞发生凋亡,为卵巢癌的治疗提供理论依据。方法:本课题采用体外培养正常上皮卵巢细胞IOS
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目的:目前,LONP1通过调控PI3K/AKT/m TOR/4e BP1信号通路参与卵巢癌的发生发展及其机制尚未见报道。本研究旨在通过探讨LONP1通过PI3K/AKT/m TOR/4e BP1信号通路对卵巢癌细胞增殖的影响,抑制LONP1的表达可以诱导卵巢癌细胞迁移和侵袭发生改变和细胞周期发生阻滞,引起卵巢癌细胞发生凋亡,为卵巢癌的治疗提供理论依据。方法:本课题采用体外培养正常上皮卵巢细胞IOSE-80细胞和上皮性卵巢癌细胞SKOV3细胞,采用CCK-8实验法,检测24h不同浓度的LONP1抑制剂CDDO-me药物作用于IOSE-80和SKOV3细胞的增殖抑制率;通过划痕实验和Transwell实验检测对细胞迁移和侵袭的影响;通过流式细胞仪实验检测IOSE-80和SKOV3细胞周期的改变;使用激光共聚焦显微镜检测各组细胞内LONP1蛋白荧光强度的变化;采用RT-q PCR检测各组细胞中LONP1、Bax、Bcl-2以及PI3K/AKT/m TOR/4e BP1信号通路相关基因的m RNA的表达量;通过Western blot实验检测IOSE-80细胞和SKOV3细胞PI3K/AKT/m TOR/4e BP1信号通路、凋亡蛋白Bax/Bcl-2和LONP1蛋白的变化。结果:CCK-8和激光共聚焦结果表明,CDDO-me以剂量依赖的方式抑制IOSE-80细胞和SKOV3细胞增殖和LONP1蛋白在细胞内的表达。CDDO-me作用于两组细胞24h后发现,2.5μg/ml的CDDO-me组显著抑制IOSE-80和SKOV3细胞增殖（P＜0.05）;划痕实验结果显示,与对照组相比,CDDO-me处理后,细胞迁移率明显降低（P＜0.05）;Transwell实验结果显示,与对照组相比,CDDO-me处理后,进入到Transwell下室的细胞数量明显减少（P＜0.05）;流式细胞仪结果显示,2.5μg/ml的CDDO-me作用于IOSE-80细胞和SKOV3细胞24h后能够引起细胞周期在G2期阻滞;RT-q PCR和Western blot结果显示,与对照组相比,抑制LONP1蛋白表达后,实验组PI3K、AKT、m TOR、4e BP1 m RNA和蛋白表达显著降低,促凋亡相关蛋白显著增高（P＜0.05）。结论:LONP1通过调控PI3K/AKT/m TOR/4e BP1信号通路影响卵巢癌细胞的增殖,抑制LONP1的表达可以降低PI3K/AKT/m TOR/4e BP1信号通路的激活,引起细胞周期阻滞,诱导卵巢癌细胞凋亡,大大降低了癌细胞的侵袭和迁移能力,为深入探究LONP1对卵巢癌的作用机制提供新的思路和见解。
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