微环境双位点荧光探针的构筑与评价

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次氯酸盐(ClO-)和过氧化氢(H2O2)作为活性氧物种家族中的重要成员,通常共存于生物体中并共同参与一些生理和病理过程。另外,极性作为一种重要的微环境,影响着诸多生化反应的进程,必然与活性氧物种各项功能的发挥息息相关。为了进一步揭示它们在生理病理过程中错综复杂的关系,开发同时检测它们的荧光探针是至关重要的。本文聚焦于ClO-与H2O2或极性之间的潜在联系,分别设计合成了多响应检测ClO-/H2O2以及ClO-/极性的双位点荧光探针。
  本文用N,N-二甲基硫代甲酸酯和硼酸酯化学修饰了一种基于荧光共振能量转移(FRET)机制的香豆素-1,8-萘酰亚胺母体荧光团,成功构筑了第一个可以同时检测ClO-和H2O2的双位点荧光探针Geisha-1,并对其紫外吸收光谱和荧光光谱进行研究。结果表明,探针对ClO-和H2O2分别表现出两种不同的turn-on荧光响应模式,而对ClO-+H2O2(ClO-和H2O2同时存在)表现出基于FRET机制的响应模式。另外,Geisha-1对ClO-和H2O2表现出优异的灵敏度,高选择性以及定量检测的潜力。进一步的活细胞和组织成像的结果表明,探针不仅具备细胞低毒性,细胞膜和组织穿透能力的优势,而且可以通过三种通道实现对ClO-和H2O2空间分布的成像。
  本文将化学响应和物理响应融入探针设计中,通过用N,N-二甲基硫代甲酸酯修饰香豆素-三苯胺荧光团,成功合成了一种检测ClO-和极性的双位点荧光探针Joka-1,并对其性能进行了初步的光谱表征。结果表明,Joka-1对ClO-表现出快速、灵敏、高选择性以及可定量检测的turn-on响应模式;而对极性的增强表现出光谱红移和荧光强度增强的响应模式,推测分别是由分子内电荷转移(ICT)效应和聚集诱导发光(AIE)效应引起的。另外,以最大发射波长为检测极性的信号,不仅具备定量检测的潜力,而且不受黏度和pH的干扰;以荧光强度为检测信号,受黏度的影响较大,可作为定性检测极性的辅助信号。
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