MAP30是从苦瓜的种子中分离纯化得到的一种均一的单链多肽分子,该蛋白质的相对分子质量大小为30kDa,是I型(单链)核糖体失活蛋白。MAP30能够以病毒感染的细胞及病毒本身作为其攻击的靶点,可以特异地抑制受病毒感染的细胞和肿瘤转化细胞,诱发其凋亡,但对正常细胞毒副作用不明显。MAP30基因不含有内含子,因此可以通过PCR方法直接从苦瓜基因组DNA中扩增获得MAP30基因。试验采用改良CTAB法提取苦瓜叶片总DNA,经PCR扩增、克隆,测序结果表明获得了苦瓜MAP30基因。试验中,构建了含组成型启动子CaMV35S的植物表达载体pBMAP1以及pBMAP2,其中pBMAP2的3’端加有一段内质网定位序列,以期使重组MAP30能够定位在内质网膜上,以减少蛋白酶对表达产物的酶解,提高其表达效率。利用农杆菌介导法转化番茄叶盘,在卡那霉素(Kan)的选择压力下,经多重筛选,获得18株抗性植株(各9株)。选取其中的6株(转pB MAP1和pBMAP2各3株)进行PCR及PCR-Southern blot分析,结果表明6株均为阳性植株。经Southernblot进一步分析,证实了3株转pBMAP1植株全部为阳性植株,只有1株转pBMAP2植株为阳性植株。RT-PCR分析结果表明,在启动子CaMV35S的作用下,MAP30基因在转pBMAP1和pBMAP2阳性植株的叶片中均有转录水平的表达。本研究通过MAP30基因克隆及植物表达载体的构建,利用转基因技术将MAP30基因导入蔬果植物番茄中,以研究探索适合MAP30基因表达的优良植物体系,并培育出能表达具有临床应用价值的抗病毒、抗肿瘤功能性药物蛋白的植物新品系,通过直接食用果实即可达到防病、治病的目的,具有重要的理论意义和现实意义。