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燃料油燃烧引起的SO2排放是形成酸雨的主要原因。随着社会经济的发展,人们对高品质清洁燃油的需求越来越大,而现状则是高含硫原油的不断增加,日益严格的环境控制标准迫切需要开发燃烧前深度脱硫技术。生物脱硫(Biodesulfurization,BDS)技术具有选择性高、反应条件温和、设备投资和操作费用低等优点,是可能取代或补充传统的加氢催化脱硫,实现燃料油深度脱硫最有效的技术之一。本论文围绕新分离的专一性脱硫菌株分支杆菌(Mycobacterium sp.)ZD-19,研究了该菌的生长脱硫特性,各种有机硫化合物的代谢途径以及模拟燃料油中休止细胞的脱硫特性。 首先,分离、筛选得到高活性的专一性脱硫菌。根据脱硫微生物的生长特性和代谢机理,从采集的不同污泥和土样中分离得到7株以4S途径代谢,专一切断二苯并噻吩(Dibenzothiophene,DBT)中C-S键,生成2-羟基联苯(2-Hydroxybiphenyl,2-HBP)的菌株。通过对菌株脱硫活性和特性比较,本实验选择19#菌株进一步研究。16S rDNA的鉴定表明,19#菌株属于分枝杆菌属(Mycobacterium sp.),命名为ZD-19。 第二,考察新分离的分支杆菌ZD-19的脱硫能力。ZD-19具有较广的底物脱硫范围,除能以DBT为硫源生长外,还能分别以噻吩(Thiophene,TH)、苯并噻吩(Benzothiophene,BTH)、4,6-二甲基二苯并噻吩(4,6-Dimethyldibenzothiophene,4,6-DMDBT)和二苯硫醚(Diphenylsulfid,DPS)为硫源生长,ZD-19休止细胞对各种有机硫化合物脱硫能力依次为TH>BTH>DPS>DBT>4,6-DMDBT,显示了较好的燃料油生物脱硫工业应用前景。同时,从DBT和4,6-DMDBT混合硫化物脱硫情况来看,ZD-19对两种底物的脱硫是同时进行的,总硫的脱硫活性只与含硫底物的组成和结构有关。 第三,研究ZD-19对不同有机硫化物的代谢途径。通过GC-MS检测分析,DBT代谢产生的终产物为2-甲氧基联苯(2-Methoxybiphenyl,2-MBP),可能是从传统4S代谢产物2-HBP苯环上连接的羟基甲基化生成,延伸了传统的4S途径。菌株代谢DBT烷烃取代物如4,6-DMDBT时,同样能把单羟基二甲基DBT的羟基甲基化,进一步证明了ZD-19具有延伸4S途径的代谢特性。另外,ZD-19代谢二苯硫醚的产物分析研究发现,ZD-19将二苯硫醚氧化成水溶性的二苯硫醚亚砜和砜,但没有检测到进一步的氧化使硫从二苯硫醚分子中释放出来。这条氧化途径类似于DBT脱硫中的Kodama途径。 传统4S途径的代谢终产物2-HBP具有生物毒性,对ZD-19细胞生长和脱硫均存在抑制。当初始2-HBP投加浓度0.1 mmol/L时,细胞生长减少一半;随着2-HBP