运动预处理对大鼠心肌缺血/再灌注损伤后心肌梗死面积及Beclin 1、LC3-Ⅱ蛋白表达的影响

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目的:研究运动预处理对大鼠心肌缺血/再灌注损伤后心肌梗死面积及Beclin 1、LC3-Ⅱ蛋白表达的影响,探讨运动预处理心肌保护相关作用机制。方法:将54只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、运动预处理组,每组18 只。采用左冠状动脉前降支(left anterior descending coronary artery,LAD)结扎制备大鼠心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)模型。心肌缺血30min后松开结扎线恢复血流实现再灌注。全程心电监测,再灌注1h后,伊文思蓝(evans blue,EB)-三苯基氯化四氮唑(triphenyl tetrazolium chloride,TTC)双染色法测定大鼠心肌梗死面积;透射电镜观察大鼠心肌细胞超微结构与自噬体的形成;T U N E L染色观察大鼠心肌细胞凋亡情况;Western Blot检测大鼠心肌Beclin 1、LC3-Ⅱ蛋白表达。结果:1、各组大鼠心肌梗死面积:假手术组无心肌缺血及梗死,其余各组的缺血区范围相比较,差异无统计学意义(P>0.05);与模型组相比,运动预处理组的IS及IS/AAR明显减小,差异有统计学意义(P<0.05)。2、各组大鼠心肌细胞超微结构与自噬体的形成:透射电镜下观察到假手术组心肌细胞形态正常,可见核周围间隙,细胞核膜完整、连续,线粒体结构完整,无水肿,肌纤维束排列有序,极少数肌纤维水肿,基本未见自噬小体;模型组心肌细胞损伤严重,细胞结构紊乱,线粒体损伤严重,嵴排列紊乱、中断,很难见到完整的细胞器,肌纤维束疏松紊乱,间质水肿,视野下可见自噬体形成;运动预处理组心肌细胞损伤较轻,线粒体结构较完整,轻微水肿,部分肌浆网水肿、扩张,自噬体较少。3、各组大鼠心肌细胞凋亡情况:假手术组大鼠仅见极少数TUNEL阳性细胞。与假手术组比较,模型组TUNEL阳性细胞比值明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,运动预处理组TUNEL阳性细胞比值明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。4、各组大鼠心肌Beclin 1、LC3-Ⅱ蛋白表达:假手术组Beclin 1、LC3-Ⅱ蛋白基础表达;与假手术组比较,模型组Beclinl、LC3-Ⅱ蛋白水平上调,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,运动预处理组Beclin1、LC3-Ⅱ蛋白水平下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.运动预处理可诱导心肌缺血耐受,抑制心肌细胞凋亡及缩小心肌梗死面积,减轻心肌缺血/再灌注损伤。2.运动预处理可下调心肌Beclin1、LC3-Ⅱ蛋白的表达,诱导自噬适度发生,改善心肌缺血再灌注心肌细胞结构。
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