【摘 要】
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酯酶是一类既可催化酯键水解又可催化酯键合成的酶的总称。其催化酯键水解时,使酯键断裂,产物为醇和酸;催化酯键合成时,使酸的羧基和醇的羟基脱水缩合,产物为酯类及其他香味物质。酯酶广泛存在于动物、植物、微生物中,且微生物中细菌、真菌中的酯酶含量较为丰富,因此微生物发酵法生产酯酶是酯酶的主要来源。由于微生物种类多、繁殖快,具有比动植物更广的作用p H,作用温度以及底物专一性,便于工业生产等优点,故微生物发
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酯酶是一类既可催化酯键水解又可催化酯键合成的酶的总称。其催化酯键水解时,使酯键断裂,产物为醇和酸;催化酯键合成时,使酸的羧基和醇的羟基脱水缩合,产物为酯类及其他香味物质。酯酶广泛存在于动物、植物、微生物中,且微生物中细菌、真菌中的酯酶含量较为丰富,因此微生物发酵法生产酯酶是酯酶的主要来源。由于微生物种类多、繁殖快,具有比动植物更广的作用p H,作用温度以及底物专一性,便于工业生产等优点,故微生物发酵法生产酯酶得到了研究人员的关注,并且已经将其广泛应用于食品加工、医药化学品、洗涤行业和环境保护等领域。因此,本文利用从新疆极端环境戈壁土壤中分离到的一株节杆菌,利用分子生物学、基因组测序等技术手段。克隆其中新颖的酯酶基因,并将纯化得到的酯酶Est D从最适温度、最适p H、最适底物浓度、金属离子、有机溶剂、表面活性剂及Na Cl浓度这几方面进行酶学性质的探究。通过细菌的分离鉴定,获得来自中国新疆阿克苏境内G30国道旁戈壁沙土的一株细菌DX4。经过多相分类方法学的研究,细菌DX4可以确定为Arthrobacter细菌属的一株全新细菌,将其定名为Arthrobacter xinjiangensis DX4T,已经保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC AB2018095)和比利时微生物菌种保藏中心(LMG 30782)。通过基因组测序发现,基因组组装得到DX4基因组大小为3.62M,GC含量为72.97%,不含质粒。通过软件Glimmer 3.02对细菌DX4的基因组进行基因预测,最终在基因组中鉴定出3253个基因编码区。编码区的平均长度为1005 bp,编码区的比例为90.1%。通过t RNA-scan发现52个t RNA序列,通过RNAmmer,从细菌DX4基因组中预测到了12个r RNA序列。对细菌Arthrobacter xinjiangensis DX4T基因组蛋白的预测中,2486个蛋白具有COG的分类号。其中功能未知的蛋白占了176个,说明细菌Arthrobacter xinjiangensis DX4T基因组比较新颖。
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