论文部分内容阅读
明日叶是我国最近从日本引种的多年生草本蔬菜,在日本广泛食用。明日叶富含查尔酮类、香豆素类、类黄酮、天然有机锗等成分,具有多种重要的生物学功能,以其为原料已开发出多种产品。由于4-羟基德里辛(4-Hydroxyderricin,4-HD)和黄色当归醇(Xanthoangelol,XAG)是明日叶中主要的功能性成分,因此为了更好的开发和利用4-HD、XAG及其相关产品,需要对4-HD和XAG进行深入的研究探讨。主要研究内容及结论下:首先,明日叶中4-HD和XAG检测方法的建立及不同部位4-HD和XAG含量的比较。采用反相高效液相色谱定量,色谱条件为:色谱柱Phenomenex C18(4.6 mm×l50mm,5μm),流动相甲醇-水(8:2,V/V),流速1.0 mL/min,进样量10μL,柱温25℃,检测波长368 nm。4-HD在11~176μg/m L、XAG在13~207μg/mL范围内呈良好线性关系,其中4-HD检出限(LOD)和定量限(LOQ)分别为1.53μg/m L和4.74μg/m L;XAG检出限和定量限分别为1.81μg/mL和5.48μg/m L;两种样品加样回收率分别为100.05%和100.37%,相对标准偏差(RSD)为1.37%和1.49%;日间精密度和日内精密度RSD均介于1.01~3.09%。含量检测结果表明,4-HD和XAG主要分布在根中。4-HD含量分布规律:根(1.83 mg/g)>茎(1.41 mg/g)>叶(0.53 mg/g);XAG含量分布规律:根(2.13 mg/g)>茎(1.92 mg/g)>叶(0.87 mg/g)。其次,明日叶中4-HD和XAG提取纯化方法的确定。通过单因素以及正交试验,优化了明日叶根中4-HD和XAG的提取工艺参数。结果表明,最佳提取条件为:提取2次、提取溶剂80%乙醇、提取温度55℃、提取时间60 min、料液比1:10(g/m L)。此时,4-HD得率为1.82 mg/g,XAG得率为2.12 mg/g。之后,采用硅胶柱层析以及半制备液相法对粗提液中的4-HD和XAG进行纯化,并对纯化物的纯度及结构进行分析。结果表明:得到的的4-HD和XAG纯度分别为99.08%和98.92%。最后,研究并比较明日叶根粗提物与纯化物(4-HD、XAG)对高脂联合链脲佐菌素(STZ)诱导的II型糖尿病模型鼠的降血糖作用。在降低糖尿病小鼠的血糖水平、血清游离脂肪酸、血清总胆固醇、血清低密度脂蛋白、动脉粥样硬化指数以及胰岛素抵抗方面,粗提取及纯化物均存在着一定的剂量效应关系,且纯化物和相应剂量的粗提物的作用效果没有显著性差异(p>0.05)。此外,粗提物还可显著降低糖尿病小鼠血清甘油三酯水平、提高血清高密度脂蛋白水平(p<0.05),且存在剂量效应关系。以上结果表明,明日叶根粗提物可改善II型糖尿病小鼠的糖代谢、脂代谢及胰岛功能,并推测主要起作用的物质可能是4-HD和XAG。