新型抑瘤双特异性抗体的实验研究

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双特异性抗体分子能够同时靶向两个不同的分子,介导免疫效应细胞特异性杀伤肿瘤,在临床上取得了不俗的疗效。目前的双特异性抗体形式多种多样,有许多已经在临床研究阶段呈现了很好的治疗效果,尤其是Catumaxomab用于治疗腹水瘤的显著疗效证明了双特异性抗体治疗癌症的巨大潜力。  本研究为了最大限度地利用免疫球蛋白Fc段的生物学功能和药代动力学优势,提高杀伤T细胞的效率,我们将靶向CD3的单链抗体与能特异性结合Her2抗原的Fc突变株融合,获得的一种命名为FcabCD3的双特异性融合蛋白。通过瞬时转染HEK-293T细胞,将FcabCD3分泌表达至上清中,然后通过Protein A亲和层析一步纯化得到。FcabCD3不但可以有效地介导T细胞杀伤Her2高表达细胞系SKBR3,也可杀伤对Herceptin不敏感的Colo205-1uc,甚至杀伤Her2低表达的细胞MDA-MB-231-1uc。在动物实验中,FcabCD3可以有效地介导T细胞抑制接种在免疫缺陷小鼠BALB/C nu/nu上的Colo205-1uc肿瘤细胞的生长。我们将TCR-like单区抗体构建成为双特异性抗体分子,并成功通过哺乳动物表达系统进行表达,分泌的双特异性抗体可以有效的介导T细胞杀伤相关多肽装载的T2细胞。此外,我们将双特异性抗体的高效性与基因治疗相结合,利用腺病毒载体导入肿瘤细胞的方法使肿瘤细胞自身表达融合抗体,结果显示感染病毒的肿瘤细胞可以持续地表达双特异性抗体,并在细胞水平观察到明显的细胞杀伤作用,这种结合方式降低了成本,优化了双特异性抗体的表达和治疗效果。
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