大白菜细胞质雄性不育系6w-9605A的鉴定及资源评价

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大白菜(Beassica campestris L. ssp.pekinensis (Lour.) Makino)原产于中国,栽培历史悠久,是我国栽培面积最大的一类蔬菜。大白菜是以营养器官为食用对象的一类蔬菜,它的杂种优势利用的主要途径为自交不亲和性和雄性不育性,而利用雄性不育系生产杂种,具有制种简单、纯度高和成本低廉的优点,所以雄性不育系的选育与利用是白菜类蔬菜杂种优势育种的理想途径。本研究采用的大白菜细胞质雄性不育系6w-9605A,是以芥菜型油菜细胞质雄性不育hau CMS为不育源,以大白菜DH系6w-9605B为轮回亲本,通过种间杂交和连续回交,经过8年的连续回交和定向选择,获得遗传稳定的BC8大白菜细胞质雄性不育系。为了综合评价大白菜细胞质雄性不育系6w-9605A,进一步开展白菜类蔬菜雄性不育系杂种优势的高效利用,本研究从表型鉴定、花药发育的细胞学研究、育性调查、恢保关系分析和细胞质分子类型鉴定等方面对6w-9605A进行资源评价;同时开展了不结球白菜hau胞质不育系的转育研究,获得了BC1代不结球白菜不育系。主要研究结果如下:1.2010年和2011年春季,分别对大白菜细胞质雄性不育系6w-9605A进行花器官观察与育性调查。结果发现该不育系花器官开放正常,花药呈三角形,干瘪无花粉,不育株率和不育度均为100%,为不育性稳定和败育彻底的细胞质雄性不育系;2.通过用石蜡切片技术,研究了大白菜细胞质雄性不育系6w-9605A及其保持系6w-9605B的花药发育过程的细胞形态学特征,确定不育系花药败育时期及方式。保持系6w-9605B花药发育正常;不育系6w-9605A花药发育受阻于孢原分化时期,占总败育花药的66.7%,不形成花粉囊和花粉粒,属于无花粉囊型败育;另外33.3%的败育花药可形成花粉囊,小孢子均受阻于单核靠边期或者二胞期,败育特点为绒毡层细胞异常肥大,挤压小孢子,导致小孢子和绒毡层解体;3.利用芸薹属作物雄性不育基因线粒体保守序列设计3对特异引物,进行PCR扩增,结果表明:在不育系6w-9605A中能扩增出772bp的片段,在其它材料中均没有发现扩增带型,与目前报道的芸薹属作物细胞质雄性不育相关基因orf224、 orfl38等均不相同,与hau CMS相关基因orf288基因同源性高达100%,表明6w-9605A属于hau胞质类型;4.在芸薹属的基本种(AA)-白菜类蔬菜中进行恢复系的筛选,在47种白菜类测交材料中,对大白菜细胞质雄性不育系6w-9605A进行了恢保关系测定,结果发现6w-9605A恢复源狭窄,其中仅5个测交F1组合中,出现大量花粉和微量花粉,表明5份白菜材料中可能存在恢复基因,并且可以恢复其不育性;5.同时对6w-9605A的苗期黄化现象进行初步研究,发现随着回交代数的增加,不育系的叶绿素含量与保持系没有显著性差异;6.为开展hau不育胞质的杂种优势利用,通过杂交与回交,将hau不育胞质转移至不结球白菜中,选育获得BC1不结球白菜不育系,调查8个组合的F1、BC1及父本的农艺性状,选出2个基本接近父本的组合。
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