酸枣仁总皂苷的提取分离纯化研究

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酸枣仁(Ziziphi Spinosae Semen)为鼠李科枣属植物酸枣(Ziziphus jujuba Mill. var. spinosa(Bunge)Huex H.F.Chou)的干燥成熟种子,具有补肝、宁心、敛汗、生津的作用,用于虚烦不眠,惊悸多梦,体虚多汗,津伤口渴等证,《本草纲目》将其列为上品。酸枣仁药用价值高,其药理作用已被深入研究。本文主要围绕酸枣仁皂苷工艺优化方向做了以下方面研究,为进一步开发利用中药酸枣仁提供具有应用价值的参考。1.建立了酸枣仁总皂苷的含量测定方法以酸枣仁皂苷A为对照品,采用比色法测定总皂苷含量,即供试液中加入5%香草醛冰醋酸溶液0.2mL,高氯酸0.8mL,摇匀,置60℃水浴中加热15min,立即置冰水浴中冷却,精密加入冰醋酸5.0mL摇匀,以随行试剂为空白,按照分光光度法,在472nm波长处测定吸光度。2.建立了酸枣仁皂苷A的含量测定方法以酸枣仁皂苷A为对照品,色谱柱系为sinochrom ODS-BP(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(40:60),流速为1.OmL-min-1,进样量为20μL,柱温:25℃,检测波长:208nm。用高效液相方法测定酸枣仁皂苷A的含量。3.优选了酸枣仁总皂苷提取工艺通过紫外分光光度法测定总皂苷提取率、总皂苷含量,利用正交实验优选酸枣仁总皂苷的提取工艺。优选出最佳的提取工艺为物料比为1:10,乙醇浓度70%,提取温度70℃,提取2次,提取时间为1小时的提取方法。4.优选了大孔树脂纯化工艺研究大孔吸附树脂纯化酸枣仁皂苷的工艺条件及参数。以酸枣仁总皂苷的吸附容量、洗脱率、回收率、精制度、酸枣仁总皂苷和酸枣仁皂苷A纯度等为指标,考察了六种大孔吸附树脂对酸枣仁总皂苷的吸附性能和洗脱参数。实验结果表明选用HPD-100大孔吸附树脂,酸枣仁总皂苷富集于70%乙醇洗脱液部位,洗脱率为91.77%,精制度为298.75%,酸枣仁皂苷A精制度为266.53%。通过大孔吸附树脂富集与纯化,可较好地纯化酸枣仁皂苷。5.完成了消泡剂在酸枣仁皂苷浓缩过程中的应用初探初步探索消泡剂在酸枣仁皂苷浓缩过程中的应用,分别以消泡率和表面张力为指标考察六种消泡剂的消泡性能,进而研究浓缩时温度、消泡剂配制浓度及消泡剂使用量对消泡作用的影响。通过研究可知选用食品消泡王消泡剂,浓缩温度为70℃,消泡剂配制浓度0.08g/mL,起泡液和消泡剂用量比为6:1,表面张力可降低30.74%,浓缩时间可减少为原来的50%,同时经酸枣仁皂苷含量测定实验表明添加消泡剂对指标成分酸枣仁皂苷的含量无影响。初步探讨得知消泡剂可较好应用于酸枣仁皂苷浓缩过程中。
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