天麻酚性成分促MCAO/R大鼠血管新生的作用及机制研究

来源 :云南中医学院 | 被引量 : 2次 | 上传用户:tianzhihen1234
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目的:通过复制大鼠脑缺血再灌注损伤(Middle cerebral artery occlusion/reper-fusion,MCAO/R)模型,观察连续给予天麻酚性成分7d、14d、28d后对大鼠脑血流量、脑微血管密度、神经学评分及促血管新生因子的影响,探讨天麻酚性成分促血管新生作用及作用机制。方法:线栓法复制SD大鼠MCAO/R模型,于再灌注2h后按神经病学评分将大鼠随机分为7d、14d、28d三批,每批动物分为假手术组、模型组、丁苯酞组、天麻酚性成分3#、4#、8#组,术后每日灌胃给予受试物。1.给予受试物7d、14d、28d,采用Longa5分法进行神经病学评分、激光散斑监测大鼠脑血流量;7d、14d,免疫荧光法检测MCAO/R大鼠脑皮层、海马齿状回微血管密度,观察3#、4#、8#对MCAO/R大鼠血管新生的影响。2.给予受试物7d、14d、28d,采用Western Blot法检测大鼠脑组织VEGFR-2、Ang-1、Ang-2、Tie-2蛋白的表达,14d、28d Western Blot法检测大鼠脑组织α-SMA、Smad-3蛋白表达的表达,观察3#对MCAO/R大鼠促血管新生因子表达的影响。结果:1.3#、4#、8#对再灌注损伤7d、14d、28d大鼠神经病学评分、脑血流量及微血管密度的影响1.1给予受试物7d,3#、4#、8#有降低MACO/R大鼠神经病学评分的趋势(P>0.05),有升高脑血流量的趋势(P>0.05),并能增加脑皮层微血管密度(P<0.05,P<0.001),其中3#能增加海马齿状回微血管密度(P<0.01),4#、8#有增加海马微血管密度的趋势(P>0.05)。1.2给予受试物14d,3#、4#、8#有降低MACO/R大鼠神经病学评分的趋势(P>0.05),有升高脑血流量的趋势(P>0.05),并能增加海马齿状回微血管密度(P<0.05,P<0.001),其中3#、8#能增加皮层微血管密度(P<0.01,P<0.001),4#有增加皮层微血管密度的趋势(P>0.05)。1.3给予受试物28d,3#、4#能降低MCAO/R大鼠神经病学评分(P<0.05,P<0.001)并且3#能升高脑血流量(P<0.05)。2.3#对再灌注7d、14d、28d大鼠脑组织促血管新生因子蛋白表达的影响2.1给予受试物7d,3#能降低MCAO/R大鼠脑组织Ang-1蛋白表达(P<0.01),有升高VEGFR-2蛋白表达的趋势(P>0.05),并且有降低Ang-2、Tie-2蛋白表达的趋势(P>0.05)。2.2给予受试物14d,3#能升高MCAO/R大鼠脑组织VEGFR-2、Smad-3蛋白表达(P<0.01,P<0.05),降低Ang-2蛋白表达(P<0.01),有升高Ang-1、α-SMA蛋白表达的趋势(P>0.05),并且有降低Tie-2蛋白表达的趋势(P>0.05)。2.3给予受试物28d,3#能升高MCAO/R大鼠脑组织VEGFR-2、α-SMA、Smad-3蛋白表达(P<0.01,P<0.05),降低Tie-2蛋白表达(P<0.05),有升高Ang-1蛋白表达的趋(P>0.05),并且有降低Ang-2蛋白表达的趋势(P>0.05)。结论:天麻酚性成分3~#通过增加MCAO/R大鼠脑内VEGFR-2、α-SMA、Smad-3及降低Ang-2的表达,促进脑缺血后血管新生、成熟,从而改善神经功能。
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