研究目的：PTEN作为肿瘤抑制基因，癌症的发生发展与PTEN的表达量下降或缺失有着紧密的关系。近年来，已经将PTEN蛋白的检测作为癌症的标志物。PTEN-Long属于PTEN的翻译变体，它可以通过分泌进入细胞内从而增加PTEN的表达量，所以PTEN-Long可被用作药物，并在肝癌中发挥抗肿瘤特性。本研究首先对PTEN-Long进行蛋白纯化，然后将PTEN-Long和索拉菲尼联用来探索对肝癌细胞的作用，并进行相关机制的探讨。
　　研究方法：1.运用AKTA纯化系统进行对PTEN-Long蛋白纯化。2.将PTEN-Long蛋白，索拉菲尼，PTEN-Long蛋白联合索拉菲尼加入到HepG2细胞来干预，进行MTT、凋亡、细胞划痕实验来观察HepG2细胞的抑制、杀伤情况。3.用western blot实验来阐明其对HepG2细胞的杀伤机制。
　　研究结果：1.PTEN-Long蛋白经AKTA纯化后，为了进一步验证纯化效果，我们用进行了考马斯亮蓝染色、western blot实验，条带位置均在75KD处。2.运用MTT方法分析了PTEN-Long、索拉菲尼、PTEN-Long联用索拉菲尼对HepG2细胞的作用，经过96小时后我们发现，PTEN-Long联合索拉菲尼组对HepG2细胞增殖抑制最明显。3.进行细胞划痕实验，经过72小时后，PTEN-Long联合索拉菲尼组对HepG2细胞的迁移抑制最明显。4.运用流式细胞术、western blot实验对HepG2细胞进行凋亡研究，经过72小时后，PTEN-Long联合索拉菲尼组增强HepG2细胞的凋亡效果最明显。5.运用western blot实验对HepG2细胞进行LC3Ⅱ自噬检测，经过72小时后，PTEN-Long联合索拉菲尼组增强HepG2细胞的自噬作用最明显。6.通过western blot实验，在HepG2细胞中评估各组对Akt，p-Akt，pras40和p-pras40的影响，PTEN-Long联合索拉菲尼组p-Akt,p-pras40下调最明显，可通过PI3K/Akt/mTOR传导通路来抑制HepG2细胞。
　　研究结论：经过蛋白纯化技术的不断摸索、改进后，我们用AKTA纯化系统对PTEN-Long蛋白进行纯化，并经过考马斯亮蓝染色及his-tag抗体验证，提示纯化效果理想。分别将PTEN-Long蛋白、索拉菲尼以及PTEN-Long蛋白联合索拉菲尼加入HepG2细胞，经过处理后，MTT、细胞划痕、凋亡、自噬以及western blot实验均发现PTEN-Long蛋白联合索拉菲尼对HepG2细胞的杀伤最明显。说明PTEN-Long蛋白联合索拉菲尼可使PI3K/Akt/mTOR的关键因子含量下降，从而抑制肝癌细胞的生长。