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目的:检测不明原因病毒性脑炎(VE)患者外周血单个核细胞(peripheral bloodmononuclear cells,PBMCs)中博尔纳病病毒(Borna Disease Virus,BDV)p24基因,探讨不明原因的病毒性脑炎患者与BDV感染的关系及BDV阳性患者的临床特征。
方法:1、根据BDV p24基因序列,设计并合成引物和荧光标记探针。以阳性质粒做阳性模板,用于标准曲线的制定和样品检测,建立检测BDV的FQ-nRT-PCR方法。
2、用已建立的FQ-nRT-PCR方法检测52份不明原因的病毒性脑炎患者和30例健康外周血单个核细胞(PBMCs)中BDV p24基因片段。同时用β-肌动蛋白(β-actin)作为内参照,并对阳性产物进行测序分析和总结阳性患者的临床特征。
结果:52例病毒性脑炎PBMCs标本BDV p24基因片段FQ-nRT-PCR检出率13.46%(7/52,拷贝数>102kb/μl。对照组30例正常体检者均为阴性(0%,0/30),经比较两者间阳性率有显著性差异(P<0.05)。PBMCs所含目的基因片段阳性产物测序后,与BDV标准病毒株V和马源的BDV病毒株H1766序列比较同源性分别为95.35%和98.84%。在4个位点出现基因突变(nt1649 T→C,nt1656 G→A,nt1670 C→T,nt1676C→T)。该目的基因片段与马源的BDV病毒株亲缘关系最近。BDV p24阳性脑炎患者主要以精神行为异常为临床特征。
结论:贵州省遵义市部分病毒性脑炎的发生与BDV感染有关,主要以精神行为异常为临床特征。