【摘 要】
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该研究用DDRT-PCR方法,以杨光圣等（1990）育成的在低温条件下表现雄性可育,而在高温处理条件下表现雄性不育的甘蓝型油菜生态型细胞质雄性不育两用系8-8112AB为材料,分析、鉴定
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该研究用DDRT-PCR方法,以杨光圣等（1990）育成的在低温条件下表现雄性可育,而在高温处理条件下表现雄性不育的甘蓝型油菜生态型细胞质雄性不育两用系8-8112AB为材料,分析、鉴定与育性相关的mRNA差异表达指纹图谱.主要结果如下：1.将DDRT-PCR差异显示技术和银染技术相结合运用油菜育性机理研究,建立了一套DDRT-PCR的技术体系.2.采用3种锚定引物（AAGCT<,12>A,AAGCT<,12>C,AAGCT<,12>G）和26种差异显示专用引物组成78种引物对,对两种温度下的处于胞原发育期的花蕾（1-2mm）mRNA的DDRT-PCR分析表明,不同引物对扩增出的带纹数目不同,最多可达70多条,有些则无,平均每对引物可扩增出约20条清楚的带纹.3.回收差异表达的cDNA,重扩增后在1.5﹪琼脂糖凝胶上电泳并检测纯度,该实验共找到了13个大小在100-250bp的差异表达cDNA片段,其中4个在高温时特异表达,另外9个在低温时特异表达.4.将获得的13条差异片段在1.5﹪琼脂糖凝胶上分离,转至尼龙膜上,制备两份尼龙膜,分别标记为H和L.5.以初步筛选到的3个阳性cDNA片段（A9、G26、C16）为探针,进一步进行Northern杂交验证.6.将cDNA片段A9转化,PCR和酶切分的证明回收到的cDNA阳性片段已成功克隆到T-pGEM质粒上.
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