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盐藻(Dunaliella Salina),是一种耐高盐的单细胞微藻,具有繁殖快,生活力强,适于养殖等特点。盐藻中含有大量的甘油、胡萝卜素、蛋白质、多糖类化合物和微量元素等一系列可利用物质,是一种具有很高经济价值的藻类。 从盐藻中提取β—胡萝卜素是目前人类从天然动植物中获得β—胡萝卜素较好途径,本课题将先进的超临界CO2提取技术应用于盐藻中β—胡萝卜素的提取,探讨了超临界CO2提取技术提取盐藻中的β—胡萝卜素的适宜工艺条件,在30MPa、45℃、CO2流量为10L/H、萃取时间为6H的条件下,β-胡萝卜素的提取率为95.09%,与常规溶剂法相比,具有萃取效率高、速度快、工艺简单、不存在任何溶剂残留、产品色味纯正等优点,研究结果表明超临界CO2萃取盐藻中的β-胡萝卜素具有产业化开发的价值。 研究中发现,超临界CO2萃取条件对盐藻中的β-胡萝卜素异构体的组成具有显著的影响,超临界CO2的提取物中顺式-β-胡萝卜素的含量为82.0%,远远高于溶剂萃取的顺式-β-胡萝卜素(含量为48.8%)。从β-胡萝卜素的生理活性上,超临界CO2提取物优于溶剂萃取的β-胡萝卜素。 提取过β—胡萝卜素的盐藻藻渣中,还含有大量的有用成分,其中多糖类组分的含量高达10%。,此类成分一直没有得到很好的利用。本文对盐藻多糖的提取进行了研究。采用正交实验确定了提取盐藻粗多糖的最佳工艺条件为100℃,提取10hr,固液比1:16,pH=9,通过中性蛋白酶对其酶解,可脱除其部分蛋白,使糖含量达到29.01%。此工艺有效地从提取过胡萝卜素的盐藻藻渣提取盐藻粗多糖,初步确定此多糖为含有硫酸基和己糖醛酸的蛋白多糖。 通过DEAE—纤维素柱层析分离盐藻粗多糖得到3个组分(PDS1、PDS2、PDS3),每个组分经过Sepharose-4B柱层析分别得到2个组分。经凝胶色谱和比旋度分析,这6个组分(PDS11、PDS12、PDS21、PDS22、PDS31、PDS32)为均一组分。 对盐藻多糖组分进行了部分理化性质的研究。红外光谱显示,此六个组分结构相似,都含有硫酸基、羧基。分别测定6个组分的比旋度、粘度及分子量,研究表明,它们均为含有硫酸基和已糖醛酸的糖蛋白。 对分离纯化的6个多糖组分进行了体外抗肿瘤活性的初步实验,结果显示,其中PDS11、PDS12、PDS21、PDS31对P388细胞有抑制增殖作用。