目的：血管瘤是一种常见的新生儿先天性的良性肿瘤,主要来源于胚胎发育过程中残余的胚胎或血管内皮细胞,分为真性血管瘤与脉管畸形,其中真性血管瘤具有血管内皮细胞异常增殖的特点。血管瘤在口腔颌面部好发,80%可以随年龄增长,到2岁以后可逐渐白行消退,但是仍有近20%的血管瘤不能自行消退。目前为止,对血管瘤的治疗没有统一、有效、简单的方案。2008年,法国医生Leaute-Labreze等偶然发现口服普萘洛尔能促进血管瘤消退,这一发现轰动了世界,各国学者纷纷开始相关研究探索,但是到目前为止普萘洛尔治疗血管瘤的机制尚不清楚。故本实验为探究普萘洛尔治疗血管瘤的机理,以离体培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为实验模型,通过体外试验检验普萘洛尔对血管内皮细胞生长、凋亡、生长因子表达的影响作用。Caspase-3是细胞凋亡的核心控制凋亡蛋白,血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor, VEGF)参与促进血管内皮细胞的增殖、迁移以及血管通透性的调节,且可以刺激血管内皮细胞的增殖、迁移和管型的形成,所以本实验尝试研究在普萘洛尔作用下培养的人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells, HUVEC)的存活率、Caspase-3及血管内皮生长因子表达变化的影响,并用传统的血管瘤治疗药物平阳霉素作为阳性对照,为普萘洛尔治疗血管瘤的机理以及治疗前景提供理论依据。方法：本实验以HUVEC细胞株为究对象,HUVEC细胞传代培养至第四代或第五代备用。细胞准备完善并分组后,分别在培养的脐静脉内皮细胞中加入不同浓度的普萘洛尔、平阳霉素、空白对照组,药物浓度梯度为128ug/ml,64ug/ml,32ug/ml,16ug/ml,8ug/ml,4ug/ml;通过实验比较在两种药物作用下,细胞的生存与增殖能力。实验首先采用MTT法检测普萘洛尔、平阳霉素作用下细胞的存活率,再用蛋白质印迹法(Western Blot)法检测比较两种药物作用下HUVEC凋亡蛋白Casepase-3的表达情况,最后通过使用酶联免疫吸附测定法(ELISA)法测定比较两种药物作用下HUVEC的生长因子VEGF蛋白的表达变化情况。以上原始实验数据均使用SPSS16.0软件统计分析,数据用均数士标准差(x±s)表示,两样本均数比较使用独立样本t检验；多个样本两两比较先使用方差分析,然后使用多样本两两比较中的SNK法进行比较,以P<0.05表示差异有统计学意义。结果：1、对照组、平阳霉素组、普萘洛尔组在作用48h时对细胞的存活、增殖无明显差异性(P>0.05)；在24h时出现了两种药物组同对照组比较细胞的增值差异明显(P<0.01),其中平阳霉素组对HUVEC生长的抑制作用明显高于普萘洛尔,在浓度低于128ug/ml时,普萘洛尔组抑制率随药物浓度的增加而增长,而平阳霉素组在浓度低于128ug/ml时,对HUVEC的抑制率与浓度增加无明显关联。2、药物浓度为128ug/ml,作用时间为24小时时,对照组、平阳霉素组、普萘洛尔组血管内皮细胞的凋亡蛋白Caspase-3均有表达,其中平阳霉素组表达量最高,普萘洛尔次之,对照组较少,两药物组表达量均明显高于对照组。3、对照组、平阳霉素组、普萘洛尔组在24h的时相点,浓度为128ug/ml时,VEGF表达量有明显差异(P<0.05),其中普萘洛尔、平阳霉素组血管内皮细胞生长因子VEGF蛋白表达量均明显低于对照组,普萘洛尔组与平阳霉素组之间无差异。结论：HUVEC在普萘洛尔的作用下表现出了细胞增殖能力的减低,VEGF蛋白表达明显降低,凋亡蛋白Caspase-3表达明显增加；其结果表明普萘洛尔能抑制血管内皮细胞的生长,继而对新生儿血管瘤有一定的治疗效果,抑制血管内皮细胞生长因子VEGF蛋白的表达及促进凋亡蛋白Caspase-3的表达属于其部分作用机制。