目的:建立寒湿困脾型泄泻小鼠模型,以黏液屏障-肠黏膜菌群稳态-靶向氨基酸代谢探讨寒湿困脾型泄泻形成和藿香正气散干预的微生态机制,为寒湿困脾型泄泻的临床治疗提供实验证据。方法:（Ⅰ）人工气候箱模拟寒湿环境应激干预和藿香正气散“以方测证”法建立寒湿困脾型泄泻小鼠模型,以证候诊断主次症标准（如稀便率、腹泻指数、粪便含水量和腹温等）评估模型。（Ⅱ）大剂量混合抗生素灌胃破坏模型小鼠肠道菌群稳态,检测小鼠粪便、肠道内容物和黏膜细菌计数和微生物活度;通过肠组织黏液屏障（如HE和AB-PAS染色切片、黏液层厚度、EL IS A检测黏蛋白M u c2等）评估肠道菌群对模型小鼠肠道黏液屏障的作用;研究肠道菌群对模型小鼠血脂和氨基酸转移酶的影响。（Ⅲ）通过肠黏膜1 6 S r R N A基因全长三代高通量测序和血清液相色谱-质谱联用技术（LC-M S）靶向氨基酸代谢组研究模型小鼠菌群多样性、组成结构、特征性菌群和功能,探究证候形成的微生态机制。（Ⅳ）造模7d+中药干预3 d后,评估藿香正气散疗效;通过肠黏膜16S r R NA基因全长三代高通量测序和血清LC-MS靶向氨基酸代谢组研究藿香正气散干预的微生态功能。（Ⅴ）肠道菌群体外培养,FDA法检测微生物活度,DNS法检测淀粉酶、木聚糖酶、蔗糖酶和纤维素酶活性,ONP G法检测乳糖酶活性,福林酚法检测蛋白酶活性。结果:（Ⅰ）模型小鼠“身重附肿,胸腹满”,稀便率、排便量和粪便含水量显著升高（P＜0.0 5）;藿香正气散显著降低稀便率和腹泻指数（P＜0.0 5）。（Ⅱ）大剂量混合抗生素干预后:模型小鼠粪便和肠道内容物微生物活度显著减少（P＜0.05）,肠道黏膜微生物活度极显著增加（P＜0.0 1）;杯状细胞个数、黏液层厚度和肠组织M u c 2含量极显著减少（P＜0.01）。（Ⅲ）模型小鼠肠黏膜菌群M et ast at和LEf S e生物标记物分析发现,肠黏膜益生菌如罗伊氏乳酸杆菌（L act ob acil l us reut eri）显著减少、条件致病菌如阴沟肠杆菌（Ent erobact er cl oacae）显著增加（P＜0.0 5）;靶向氨基酸代谢组结果发现A l a和G l u等是模型小鼠的差异性氨基酸代谢产物（P＜0.05）;肠黏膜菌群和机体氨基酸代谢相关性关联分析发现寒湿困脾型泄泻差异菌与机体Gl u、M et和Asp等密切相关（P＜0.05）。（Ⅳ）藿香正气散干预后,黏液层厚度和Muc2基本恢复到正常水平（P＜0.0 5）。（Ⅴ）藿香正气散显著提高模型小鼠罗伊氏乳杆菌（L act obaci l lus re ut eri）和约氏乳杆菌（L act obaci ll us j ohnsonii）的丰度,显著降低严格厌氧梭状芽孢杆菌1（C l ost ridi um sensu st ri cto1）、梭状芽孢杆菌N D 2（C l o s t r i d i u m s p.N D 2）和螺旋杆菌（Heli cobact er）丰度（P＜0.05）;密度曲线分析发现,藿香正气散可恢复模型小鼠Asp和Gl u含量;Z-s c ore分析表明,藿香正气散可增加模型小鼠GAB A的含量。（Ⅵ）体外培养发现,藿香正气散可以促进模型小鼠肠道乳酸菌的增殖（P＜0.05）。模型小鼠肠道内容物的微生物活度极显著升高（P＜0.0 1）;肠道内容物和黏膜的乳糖酶、淀粉酶、蛋白酶等活性极显著升高（P＜0.0 1）。藿香正气散可以显著降低模型小鼠的肠道内容物乳糖酶活性（P＜0.05）,显著提高肠道黏膜木聚糖酶和淀粉酶活性（P＜0.0 5）。结论:（Ⅰ）“人工气候箱低温高湿环境模拟法”可以建立基本符合寒湿困脾型泄泻临床表现的小鼠证候模型。（Ⅱ）肠道菌群稳态对寒湿困脾型泄泻小鼠肠黏液屏障具有重要的影响作用,罗伊氏乳酸杆菌（Lact ob acil l us r e u t e r i）减少、阴沟肠杆菌（E n t e r o b a c t e r c l o a c a e）的增加导致寒湿困脾型泄泻小鼠肠黏膜稳态失调,肠黏膜稳态失调与寒湿困脾型泄泻小鼠氨基酸类神经递质如Gl u及其相关代谢产物如Gl n、GAB A的异常表达密切相关。（Ⅲ）藿香正气散可以升高模型小鼠肠黏膜益生菌如罗伊氏乳杆菌和约氏乳杆菌的丰度,降低梭状芽孢杆菌（C l ostri di um）、螺旋杆菌（Hel i cobact er）的丰度,调整肠黏膜菌群稳态和氨基酸类神经递质如A s p、G l u代谢、保护肠黏液屏障。（Ⅳ）寒湿困脾型泄泻小鼠的形成阶段表现为消化酶活性水平的显著升高,藿香正气散对寒湿困脾型泄泻小鼠的乳糖酶、木聚糖酶和淀粉酶的活性具有重要的干预作用,这可能与寒湿应激环境刺激导致的能量需求增加相关。（Ⅴ）肠道黏膜稳态和菌群稳态介导的神经递质类氨基酸代谢可能是寒湿困脾型泄泻的形成和藿香正气散干预的重要微生态机制之一。