【摘 要】
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目的:本研究拟在肿瘤微环境中探讨乳腺癌细胞中的lncRNA SNHG3对BMSCs成骨分化能力的影响及作用机制。方法:利用TCGA数据库分析lncRNA SNHG3在乳腺癌组织中的表达水平。采用实时荧光定量PCR检测乳腺癌组织和细胞系中lncRNA SNHG3的表达水平。构建敲低lncRNA SNHG3的稳转MDA-MB-231细胞株并通过实时荧光定量PCR验证。采用ALP染色和ALP活性检测实验
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目的:本研究拟在肿瘤微环境中探讨乳腺癌细胞中的lncRNA SNHG3对BMSCs成骨分化能力的影响及作用机制。方法:利用TCGA数据库分析lncRNA SNHG3在乳腺癌组织中的表达水平。采用实时荧光定量PCR检测乳腺癌组织和细胞系中lncRNA SNHG3的表达水平。构建敲低lncRNA SNHG3的稳转MDA-MB-231细胞株并通过实时荧光定量PCR验证。采用ALP染色和ALP活性检测实验以及OPG、OSX、RUNX2、BMP2与BMP3的Western blot,验证骨髓间充质干细胞（BMSCs）的体内外成骨作用。分别提取对照组和MDA-MB-231/sh SNHGS组的外泌体进行鉴定和测序,并通过miRNA的实时荧光定量PCR验证分析了lncRNA SNHG3的靶向miRNA。采用生物信息学预测并利用双荧光素酶报告基因分析法观察miR-1273g-3p分别与lncRNA SNHG3和BMP3的结合位点。结果:Lnc RNA SNHG3在乳腺癌组织中高表达,同时其表达水平与乳腺癌骨转移呈正相关。ALP染色、活性检测以及Western blot结果表明,下调乳腺癌细胞lncRNA SNHG3的表达可明显提升BMSCs的成骨能力。在提取的细胞上清液中检测到外泌体的存在。在乳腺癌细胞与BMSCs的细胞间相互作用中,lncRNA SNHG3/miR-1273g-3p/BMP3轴正向调控骨形态发生蛋白3（BMP3）的表达。结论:敲低乳腺癌细胞中的lncRNA SNHG3,通过lncRNA SNHG3/miR-1273g-3p/BMP3轴促进乳腺癌骨微环境中BMSCs成骨分化。以上结果提示lncRNA SNHG3可能是乳腺癌骨转移的潜在治疗靶点。
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