长链非编码RNA NR026797在胃腺癌组织中表达的临床意义及其功能的研究

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目的:胃癌是我国常见恶性肿瘤之一,相比晚期胃癌患者,早期胃癌的临床疗效比较确切,患者术后恢复好,5年生存率高。研究显示,癌组织中表达水平发生显著变化的长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lncRNA)对癌细胞的增殖、迁移、侵袭等有影响。为此,我们展开在胃腺癌中异常表达的lncRNA的临床与科研研究,力图为提高早期胃癌诊断提供理论依据。方法:1、根据胃癌相关lncRNA表达谱,谱筛选出一条全新的、具有临床意义、未在胃癌领域研究过的LncRNA NR026797作课题研究。采用qPCR技术验证80例胃腺癌-癌旁配对旁组织、30例萎缩性胃炎组织中LncRNANR026797的表达水平;统计分析LncRNANR026797表达水平与患者临床病理参数之间的相关性。2、验证 LncRNANR026797 在 SGC-7901、AGS、BGC-823、MGC-803 四株胃癌细胞株中的表达水平;利用小干扰RNA(siRNA)沉默技术,抑制LncRNA NR026797在胃腺癌细胞中的表达,通过CCK-8细胞增殖实验、平板克隆细胞集落形成实验、Transwell迁移及侵袭实验,研究抑制LncRNA NR<sub>026797表达后,胃腺癌细胞的生物学行为是否受到影响。3、根据靶基因预测结果,分析基质金属蛋白酶-19(MMP19)在胃腺癌-癌旁配对组织中表达情况,MMP19表达水平与患者临床病理参数、LncRNA NR026797表达水平之间的相关性。结果:1、根据胃癌相关lncRNA表达谱,目的lncRNA筛选原则,筛选出LncRNA NR026797作课题研究对象。qPCR实验结果显示,LncRNANR<sub>026797在胃癌-癌旁组织中上调表达率为66.25%,差异表达倍数为8.05倍。临床病理资料统计分析表明LncRNANR026797 在肿瘤≥3cm(P=0.046)、低分化程度(P=0.0028)、T4 期(P=0.033)、Ki67阳性率高(P=0.011)的癌组织内表达量高。2、LncRNANR026797 在 SGC-7901、AGS、BGC-823、MGC-803 四株胃癌细胞株中表达上调,与lncRNA表达谱及临床样本验证结果一致;抑制LncRNANR026797在胃癌细胞株中的表达后发现,胃癌细胞分裂能力、单克隆集落形成能力、增殖潜能、细胞迁移、侵袭能力均减弱,差异具有统计学意义。3、MMP19在胃癌组织中呈上调表达,上调表达率63.5%,差异表达倍数为7.25倍;MMP19的上调表达与肿瘤≥3cm、T4期、伴有淋巴转移有关。统计分析LncRNA NR026797表达量与MMP19表达量之间相关性,MMP19表达水平变化与LncRNA NR026797呈正相关,相关系数R值为0.557,P<0.001。ROC曲线结果显示LncRNA NR026797 的曲线下面积 AUC=0.709,P<0.001;MMP19 的曲线下面积 AUC 是 0.739,P<0.001。结论:1、LncRNA NR<sub>026797在胃腺癌组织中表达量显著增高,异常增高的LncRNA NR026797可能预示着患者所患肿瘤直径大、临床分期晚、分化程低,这些都提示患者预后可能相对比较差。2、LncRNANR026797 在 SGC-7901、AGS、BGC-823、MGC-803 四株胃癌细胞株中高表达;抑制LncRNANR026797的表达后,胃腺癌细胞株的分裂、增殖、迁移和侵袭生物学行为受到影响。3、MMP19在胃腺癌样本中呈高表达,MMP19的上调表达与肿瘤直径大、分期晚、伴有淋巴转移有关;胃腺癌组织中MMP19与LncRNANR026797的表达为正相关,二者之间存在某种共表达关联,需进一步科研实验来分析。
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