黄酮苷属多羟基化合物,是诸多天然药物的主要成分,实际应用过程中存在易被氧化、脂溶性低、半衰期短、易产生毒副作用等缺陷。研究表明,在保留药物原有基本骨架的基础上,进行适当的结构修饰,可有效地改变原有药物的理化特性和药物的转运与代谢过程,从而提高其临床药效和生物利用度。为此,本文以固定化脂肪酶为催化剂,构建了活性黄酮苷类化合物的酰化修饰体系,探究了相关因素对该酶促酰化反应的影响机制及底物识别规律。本文以具有较大比表面积的磁性纳米粒子作为脂肪酶固定化的载体,通过多巴胺对其表面进行修饰,使其拥有更多的氨基、巯基等活性基团;在此基础上,通过席夫碱反应使黑曲霉脂肪酶稳定地固定在磁性纳米粒子表面。经优化实验,该酶固定化最佳的载体/酶(质量比)、固定化温度、溶液pH、固定化时间分别为5:1、40°C、8.5和10 h,在此条件下,固定化酶的转酯活力和蛋白负载量最佳,分别为1305 U/g和155 mg/g。以天麻苷辛酰化反应为模型,研究了固定化脂肪酶催化天麻苷区域选择性酰化反应的特性,经优化该反应最适宜的有机溶剂、底物摩尔比、温度、酶量分别为四氢呋喃、12、70 U和50°C。在此条件下,酶促反应速度、底物转化率和天麻苷二辛酸酯区域选择性分别为12.34 mM/h,98.24%和100%;而酶促动力学的研究结果则表明,该固定化酶在THF中催化酯衍生物合成的K_m(41.76 mM)值相对其他有机溶剂体系(69.82-74.46 mM)而言最低,表明在所研究范围内THF是该酶促合成过程的最适宜溶剂。以上述研究为基础,以12种不同结构酰基供体及11种黄酮苷类化合物作为反应底物,揭示了黄酮苷类化合物酰化过程中酶与底物的识别规律。对酰基供体的识别研究表明,天麻苷均可高效的转化为相应的双酯衍生物,其中以癸酰化的反应最快,为14.10 mM/h,以巴豆酰化的反应最慢,为6.74 mM/h,酰基供体中双键的存在是导致上述现象的原因。槲皮苷、异槲皮苷、白藜芦醇苷、熊果苷、紫云英苷、金丝桃苷和杨梅苷均可合成相应的单酯衍生物,但转化率差异较大(65.18-98.56%),而矢车菊3-O葡萄糖苷、二氢杨梅素、二氢槲皮素和黄岑苷则没有发生酶促酰化反应,这可能与底物的结构差异有关。