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膀胱癌居我国泌尿系统肿瘤发病率的首位，近年来有递增趋势。手术治疗是膀胱癌的主要治疗方式(主要包括经尿道膀胱肿瘤电切术、膀胱部分切除术和根治性全膀胱切除术)，同时术后给予辅助化疗以及免疫治疗等，临床效果较好，但术后肿瘤复发率高给临床带来挑战。临床中缺少敏感而特异的膀胱肿瘤预后指标，从分子及基因水平研究影响膀胱癌发生、进展及复发的原因，已成为热点问题。目的：对肿瘤标记物p53、PCNA或VEGF蛋白的表达在膀胱肿瘤中的作用已有过讨论，而运用单个分子来分析显然是不够的，本文联合三种蛋白表达探讨与病理分级、临床分期及预后的关系。综合p53、PCNA、VEGF三种肿瘤标志物的表达和其它多因素分析膀胱肿瘤术后复发相关因素。评估三种肿瘤标志物是否可以作为判断膀胱移行细胞癌生物学行为的指标及临床应用价值，以便为临床诊断、治疗、判断预后提供理论依据。方法：回顾性分析承德医学院附属医院泌尿外科手术治疗的68例膀胱移行细胞癌(transitional cell carcinoma of bladder，BTCC)患者标本蜡块，及随访过程中复发患者32例的术后标本蜡块共计100例，随访起于2008年1月至2011年12月截止，所有标本均经病理诊断为膀胱移行细胞癌，同时选取8例良性前列腺增生开放手术膀胱组织作为对照，采用免疫组织化学MaxVision法检测108例石蜡标本中p53、PCNA、VEGF的表达，将染色结果分别按一定标准分为三个级别，采用χ2检验或Fisher精确概率法及Spearman等级相关分析其与膀胱癌分期、分级和复发情况的关系及三种蛋白表达之间的相关性。68名初发患者均获得随访，随访2～40个月不等，按UICC—TNM标准分为浅表型(Tis～T1)41例，均行经尿道膀胱肿瘤电切术(transuretheral resection of bladder tumor,TUR-BT)，浸润型(T2～T4)27例，其中TURB-t术5例，根治性膀胱切除2例，膀胱部分切除20例；32例膀胱肿瘤复发，其中3例死于膀胱肿瘤进展，19例行膀胱部分切除术，10例再次行TURB-t术；未复发患者36例，其中2例死于非肿瘤并发症，11例患者失访。所有患者常规术后半小时内给予吡柔比星20~30mg即刻灌注；术后1周开始进行维持灌注治疗（每周1次，8次，此后每月1次，至2年），灌注药物主要有吡柔比星、丝裂霉素或羟基喜树碱等。术后每3个月复查膀胱镜1次；19例未坚持足疗程灌药，其余49例依从性好。用Kaplan-Meier法对随访病例进行生存分析，建立p53、PCNA、VEGF三种蛋白表达情况、年龄、性别、临床分期、病理分级、肿瘤数目、术后是否坚持灌注用药等多因素影响膀胱肿瘤复发的COX比例风险模型。结果：1.正常膀胱组织与肿瘤组织比较膀胱癌组织三种蛋白表达阳性率均显著高于正常尿路上皮(P<0.05)。2.初发组与复发组比较复发组p53、PCNA、VEGF表达阳性率显著高于初发组(P<0.05)。3. p53、PCNA、VEGF的表达与临床病理特征的关系p53、PCNA、VEGF的表达在BTCC组织各病理分级、临床分期各组间比较均有显著差异(P<0.05)；spearman等级相关分析表明三种蛋白的表达均与BTCC组织的分级、分期及复发情况呈正相关(P<0.01)；4. p53、PCNA、VEGF在膀胱肿瘤组织中表达率的关系PCNA的表达与p53（r=0.654，kappa=0.602）及VEGF（r=0.659，kappa=0.510）的表达呈显著正相关（P<0.01），kappa检验结果一致性较好（P<0.01），p53及VEGF（r=0.300，kappa=0.147）在膀胱癌组织中的阳性表达率呈弱正相关(P<0.05)，kappa检验结果一致性差（P<0.05）。5. P53、VEGF、PCNA表达与膀胱肿瘤预后关系的随访结果KapIan-Meier法结果表明VEGF阴性表达组较阳性表达组术后无瘤生存时间明显延长(P<0.05)，p53阴性表达组较阳性表达组术后无瘤生存时间明显延长(P<0.05)，PCNAⅠ级表达组与（Ⅱ～Ⅲ）表达组术后无瘤生存时间无明显区别(P＞0.05)。6.膀胱癌复发的多因素分析单因素分析表明不同肿瘤病理分级、临床分期、手术方式、p53表达、VEGF表达、肿瘤数目及术后是否坚持灌药间肿瘤复发差异均有统计学意义(均P<0.05)，COX回归模型多因素分析后，临床分期（RR=4.162，P=0.001）、p53表达（RR=2.913，P=0.038）、VEGF表达（RR=3.316，P=0.010）作为肿瘤复发的危险因素进入模型，术后灌注化疗（RR=0.217，P=0.000）作为保护性因素进入模型。结论：1膀胱癌组织中p53、PCNA和VEGF蛋白表达阳性率均显著高于正常尿路上皮组织。2P53、PCNA、VEGF蛋白的表达率在膀胱癌组织不同临床分期、病理分级及原发组与复发组比较均有显著差异，三种蛋白的表达与膀胱癌组织的临床分期、病理分级、复发状况均呈正相关，肿瘤组织浸润越广泛，肿瘤细胞分化程度越低，三种蛋白表达阳性率升高越显著，复发患者的阳性率显著高于初发患者。3PCNA与P53在膀胱癌组织中的表达水平显著正相关，一致性较好；PCNA与VEGF在膀胱癌组织中的表达水平显著正相关，一致性较好；P53与VEGF在膀胱肿瘤组织中的表达水平相关性弱，一致性差，三种蛋白在膀胱癌的发生、进展过程中有协同作用。P53与VEGF分别通过不同路径诱导了膀胱肿瘤的复发，可作为膀胱移行细胞癌分化程度和预后的参考，而PCNA的表达失控参与了VEGF与p53诱导膀胱肿瘤复发的中间环节，是细胞处于高增值状态的表现。4临床分期、p53表达及VEGF表达对术后复发有显著影响，病理分级、肿瘤数目、及PCNA的表达也与肿瘤复发相关。术后灌注用药可延长患者的无瘤生存时间。