基于经典名方中药“标准煎液”芍药甘草汤指纹图谱及药效学研究

来源 :黑龙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:coretech333
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目的:通过对自东汉时期起至近代史与度量衡历史沿革的相关文献进行收集整理,对经典名方芍药甘草汤药材基准、用量、煎煮方法等进行考证。建立经典名方芍药甘草汤中药复方物质基准的研究及量值传递关系,并以小鼠癫痫模型探讨芍药甘草汤滋阴血,缓挛急的作用机制。方法:(1)采用文献计量学方法,对从汉代前及汉代开始的历代度量衡制度的发展变革进行文献整理分析,梳理历代度量衡演变过程。(2)在文献研究的基础上,确证芍药甘草汤的煎煮方法、用量及处方中药材基源,利用HPLC方法对处方中甘草药材-饮片-甘草炮制品指纹图及量值传递关系研究,对比甘草-饮片-甘草炮制品前后之间共有峰和特征峰的变化规律及含量值的变化范围,为甘草提供用药的实验验证基础。(3)在文献研究的基础上,考察古典医籍中记载芍药甘草汤煎煮中的关键工艺技术参数变化规律,采用HPLC方法测定其物质基准的指纹图谱及量值传递效应值,建立芍药甘草汤基准物质研究,对该经典方剂中药材基源、药用部位与对应实物制备方法与古籍记载的相关性进行一致性评价。(4)将古典医籍记载的芍药甘草汤煎煮的对应实物,与现代临床上使用的配方颗粒、正交优化法的现代制备工艺对比研究,利用HPLC法测定三者的指纹图谱,标定共有峰,指认特征色谱峰,并进行相似度评价。对比古籍记载煎煮方法与临床配方颗粒、正交优化法的工艺之间物质基准对应实物的差异性,旨在为全面控制芍药甘草汤质量和临床应用的有效性和安全性提供科学的实验依据。(5)基于芍药甘草汤滋阴血,缓挛急,以古籍记载煎煮方法获得的芍药甘草汤针对癫痫引起的痉挛、抽搐进行药效学研究。采用青霉素注射法致痫,分为芍药甘草汤高、中、低剂量组、丙戊酸钠阳性药组、模型组与空白组,给药7天致痫后,一部分测定各组的MDA、SOD、ATP的含量和活性,另一部分利用小鼠进行定位航行及空间搜索实验,探讨芍药甘草汤对青霉素所致癫痫小鼠的指标控制及对其大脑的保护作用。结果:(1)通过对历代度量衡制度历史沿革文献汇总和抽提,根据东汉时期货币、权器、累黍、水比重、黄金比重法最后考证,利用文献计量方法研究,以东汉一两相当于现代以15.6克计,其一升以现代200毫升作为本实验经典名方芍药甘草汤的度量衡剂量。(2)对生甘草、炒制甘草和蜜炙甘草基准物质对比研究,在指纹图谱中,共有峰和特征色谱峰数目有不同程度的变化。炒甘草与生甘草相比共有峰消失一处,蜜炙甘草与生甘草相比,共有峰消失三处;三者供试品中甘草苷含量排序为生甘草>炒甘草>蜜炙甘草,甘草酸铵含量排序为蜜炙甘草>生甘草>炒甘草。(3)对经典名方古籍记载煎煮方法、配方颗粒溶液和正交优化法的工艺溶液基准物质对应实物对比研究,传统汤剂与优化工艺共有峰数目基本变化不大,共28个,配方颗粒剂共有峰数目为25个,特征峰量值传递关系呈差异性,综合评分值比较关系为正交工艺溶液>经典名方>配方颗粒溶液。(4)芍药甘草汤对癫痫模型小鼠的抽搐和MDA、SOD、ATP均有不同程度的改善。通过水迷宫实验可以看出随着小鼠学习天数与次数的增加,芍药甘草汤高剂量组,第2~5天寻找平台潜伏期的时间与模型组相比均有极显著性差异(P<0.01)且1~4天寻找平台潜伏期的时间在逐渐缩短,表明芍药甘草汤对青霉素所致的癫痫小鼠学习障碍有明显改善。结论:经典名方芍药甘草汤物质基准对应实物的不同制备方法量值传递关系具有显著性差异。物质基准量值传递关系,能够较全面反映出经典名方物质组分的传递状态。芍药甘草汤初步药效学研究表明,其能够改善癫痫模型小鼠的痉挛症状及学习记忆能力。
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