一．背景 肺癌已成为人类癌症死亡的首要原因。在我国，肺癌发病率占男性恶性肿瘤的第一位，在女性中亦仅次于乳腺癌居第二位；在美国，肺癌的发病率和死亡率均居所有癌症之首，2005年死于肺癌的人数超过160000。虽然肺癌的早期诊断取得了一些进展，但只有约15％的患者在确诊时为早期病变，大多数患者确诊时已丧失手术机会。在发达国家，肺癌的5年生存率约10％～15％。肺癌按病理类型分为小细胞肺癌(Small cell lung cancer，SCLC)和非小细胞肺癌(Non smallcell lung cancer，NSCLC)。其中SCIC约占20％，大多数对化学治疗(简称化疗)敏感，但容易于化疗后10～12个月内复发。NSCLC约占80％，晚期NSCLC的标准一线化疗方案相对于最佳支持治疗能有效延长中位生存期和提高1年生存率。但是，目前传统化疗的疗效似乎到达了一个平台：其客观有效率约30％，中位生存期8～9个月，1年生存率30％～40％。因此寻找新的、有效的肺癌早期诊断和治疗手段已成为近年来肺癌研究的热点之一。 1995年，Sakaguchi等首次报道CD4+CD25+调节性T细胞(Regulatory Tcells，Tregs)以来，越来越多的研究证明这一独立的T细胞亚群在自身免疫监视(immunosurveillance)中发挥着重要的作用。CD4+CD25+ Treg细胞能够抑制众多类型的免疫反应，包括抑制抗肿瘤免疫反应。近年的研究表明，在许多癌症(包括乳腺癌、胰腺癌、卵巢癌、黑色素瘤等)患者体内CD4+T细胞比例比例中CD4+CD25+Treg细胞明显增加，提示CD4+CD25+Treg细胞增加，从而抑制机体对肿瘤的免疫监视，可能参与了肿瘤的发生、发展。CD4+CD25+Treg细胞的清除虽然不能完全消灭已存在的肿瘤，但是能增强肿瘤免疫治疗的效果。 二．目的： 本研究探讨肺癌患者外周血中CD4+CD25+Treg细胞的变化及其与肺癌的临床分期、病理类型及化疗疗效的关系，为临床实践提供参考。同时与目前临床上常用的肺癌相关肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片断(CYFRA21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)进行比较，以进一步了解CD4+CD25+Treg细胞对肺癌诊断的预测价值。 三．材料与方法： 选取2007年10月～2008年4月在中山大学附属第一医院呼吸内科、胸外科及中山大学附属肿瘤防治中心胸科住院的肺癌患者60例和良性肺部疾病者20例为研究对象，同时设立健康对照组20例。采用流式细胞仪检测外周血CD4+CD25+Treg细胞，并用电化学发光法(ECLIA)检测CEA、CFRA21-1和NSE。 对上述受试者的临床资料按年龄、性别、肺癌的病理类型、临床分期、化疗后疗效等进行归类分析，使用SPSS 13.O统计软件进行统计处理。 四．结果： 1.外周血CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞水平与年龄、性别及吸烟均无相关性。 2.肺癌组、良性肺病组与健康对照组外周血CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞水平的比较肺癌组CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞比例(20.93％±4.47％)高于良性肺病组(15.14％±4.79％)和健康对照组(15.42％±3.44％)，P值均<0.01。而良性肺病组与健康对照组间CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞比例无统计学差异(P=0.787)。 3.肺癌组外周血CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞水平与病理类型的关系CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞比例在肺腺癌组(20.56％±4.89％)、肺鳞癌组(21.78％±4.02％)及小细胞肺癌组间(20.32％±3.45％)均无统计学差异．(P=0.582)。NSCLC组和SCILC组的CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞比例分别为21.05％±4.67％和20.32％±3.45％，亦无统计学差异(P=0.599)。 4.不同临床分期肺癌患者外周血CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞比例无统计学差异。 5.外周血CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞水平与晚期NSCLC化疗疗效的分析对接受2周期以上全身化疗的14例NSCLC患者(Ⅲb期和Ⅳ期)，评估2周期化疗结束后的疗效，其中CR 0人，PR 6人，SD 6人，PD 2人，并比较CR+PR组与SD+PD组CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞水平。结果，CR+PR组患者的CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞比例(16.30％4±4.14％)明显低于SD+PD组(21.32％±4.52％)，差值有统计学意义(P=0.02)。 6.外周血CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞水平对肺癌的诊断价值分析 6.1.外周血CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞比例、CEA、CYFRA21-1、NSE的接收者工作特征(Receiver operating characteristic，ROC)曲线下面积(Az)分别为0.824(0.741~0.907)、0.74(0.643~0.836)、0.818(0.715~0.92)、0.655(0.517~0.793)。因此，认为外周血CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞比例、CEA、CYFRA21-1对肺癌具有中等程度的诊断价值，而NSE对肺癌的诊断价值较低。 6.2.诊断界值以ROC曲线最靠近左上角的点对应的取值为界值，外周血CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞比例、CEA、CYFRA21-1、NSE的诊断界值分别为17.93％、2.60ng/ml、2.65ng/ml、12.23ng/ml，灵敏度分别为76.7％、66.7％、71.7％、61.7％，特异度分别为75.0％、77.5％、80％、60％。 7.联合检测 应用外周血CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞比例与目前最常用的肺癌肿瘤标志物CEA联合检测，灵敏度为90％，特异度为55％，灵敏度较用单一指标检测明显提高，但特异度也相应下降。 五．结论： 1.肺癌患者外周血中CD4+CD25+Treg细胞/CD4+T细胞比例较良性肺部疾病者及健康对照者均明显增高。 2.外周血CD4+CD25+Treg细胞/CD4+T细胞比例与年龄、性别、是否吸烟无明显相关性。 3.肺癌患者外周血中CD4+CD25+Treg细胞/CD4+T细胞比例与病理类型及临床分期无关，但外周血中CD4+CD25+Treg细胞/CD4+T细胞比例较低者对全身化疗的疗效较好。 4.检测外周血中CD4+CD25+Treg细胞/CD4+T细胞比例有助于鉴别良恶性肺部疾病，其诊断价值与CEA、CFRA21-1相似，优于NSE。 5.外周血中CD4+CD25+Treg细胞/CD4+T细胞比例与目前常用的肺癌肿瘤标志物CEA、CFRA21-1及NSE无相关性，联合检测能提高灵敏度。