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猪链球菌(Streptococcus suis)是猪链球菌病的主要病原,给养猪业造成严重的经济损失。此外,猪链球菌还会感染人,是重要的人畜共患病病原菌。基于荚膜多糖抗原性的不同,猪链球菌可分为多种血清型和部分未定型菌株;其中,能感染人的血清型有2、4、5、9、14、16、21、24等。近年来,发现了 21种猪链球菌新的荚膜多糖相关基因簇(NCLs),这些含NCLs的菌株无法用原有针对33种血清型的抗体分型;目前对这些含有NCLs菌株的病原特性了解还非常缺乏。健康猪携带猪链球菌的阳性率较高,且血清型多而复杂,是潜在的传染源,特别是那些能感染人的血清型更具公共卫生意义。因此,对屠宰场健康猪进行猪链球菌带菌情况监测,是猪链球菌病流行病学调查的重要方法之一。通过对江苏某市屠宰场健康猪群进行猪链球菌流行病学调查并分析含有NCLs菌株的病原特性,为了解该地区猪链球菌病的发病规律、制定该地区猪链球菌病的防控策略、进一步揭示猪链球菌病原特性提供参考。1江苏省某市屠宰场猪链球菌流行病学调查分别于2017年9月至12月从江苏省某市QX屠宰场采集生猪扁桃体184份。以看家基因谷氨酸脱氢酶基因gdh和DNA修复蛋白基因recN作为猪链球菌种特异性基因进行PCR扩增,二者均为阳性的扁桃体占76.6%(141/184)。针对上述8种感染人血清型,采用血清型特异性引物,应用PCR方法对猪链球菌阳性的扁桃体样品进一步分型,2、4、5、9、14、16、21、24型的检出率分别为 27.7%(51/184)、27.7%(51/184)、23.4%(43/184)、25%(46/184)、0(0/184)、28.8%(53/184)、12.5%(23/184)、1.6%(3/184)。对猪链球菌阳性的扁桃体样本分离单菌落,共获得178株猪链球菌。纯化后单菌落经PCR分型,未知血清型菌株15株,可定型菌株163株,分属20种血清型,其中分离率最高的为31型占12.4%(22/178),其余血清型分离率分别为:9型占 11.8%(21/178)、16型占 10.1%(18/178)、4型占 10.1%(18/178)、2 型占 9.0%(16/178)、3 型占 6.7%(12/178)、5 型占 6.2%(11/178)、7 型占 5.1%(9/178)、28 型占 3.9%(7/178)、8 型占 3.4%(6/178)、21 型占 2.2%(4/178)、11 型占 1.7%(3/178)、12 型占 1.7%(3/178)、23 型占 1.7%(3/178)、25 型占 1.7%(3/178)、30 型占 1.7%(3/178)、15 型占 1.1%(2/178)、13 型占 0.6%(1/178)、29 型占 0.6%(1/178)。2含有新的荚膜多糖相关基因簇菌株病原特性分析以21种NCLs特异性引物对15株未定型菌株进行PCR分型,鉴定出9株属于NCLs,分别为:NCL-1(WUSS236、WUSS294、WUSS356)、NCL-4(WUSS284、WUSS351)、NCL-3(WUSS421)、NCL-5(WUSS234)、NCL-11(WUSS423)和NCL-17(WUSS422)。通过多位点序列分型方法,WUSS421属于ST 258,其它8株NCLs菌株为新的ST型,表明这些菌株与目前主要流行致病菌株亲缘关系较远。检测这些NCLs菌株对青霉素G钠、阿莫西林、头孢噻呋钠、红霉素、替米考星、盐酸林可霉素、盐酸万古霉素、替考拉宁、恩诺沙星、氟苯尼考10种常用抗生素的敏感性,表明多重耐药的情况严重,其中WUSS294、WUSS351、WUSS421对6种抗生素耐药,WUSS236、WUSS422对5种抗生素耐药,WUSS284、WUSS356对4种抗生素耐药,WUSS234、WUSS423对3种抗生素耐药,另有WUSS234、WUSS284、WUSS351、WUSS421、WUSS422和WUSS423对氟苯尼考中度敏感。斑马鱼毒力试验显示,上述菌株的毒力均低于猪链球菌2型毒力参考株SC070731(对斑马鱼半数致死量为8.6×105CFU/尾),其中3株毒力最强的NCLs猪链球菌WUSS234、WUSS351和WUSS422对斑马鱼半数致死量分别为1.2 × 107 CFU/尾,1.1× 106 CFU/尾和2 ×107 CFU/尾。综合MIC试验和斑马鱼试验结果分析,WUSS351菌株对斑马鱼的半数致死量与SC070731相近,且对6种抗生素耐药,对氟苯尼考中度敏感,值得关注。