固定高浓度CO2富油微藻的筛选及脂质累积的过程生化研究

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为了降低微藻生物质柴油制备的成本及获得具有工业化应用潜力的微藻藻株,本研究旨在通过限制性筛选,获得能够固定高浓度CO2的具有生物柴油生产潜力的微藻藻株;利用此藻株为研究对象,建立微藻油脂原位监控技术;探究氮源浓度对微藻细胞生长和胞内油脂含量的影响,为工业烟道废气的固定减排及微藻生物质能的深入研究奠定基础。本研究主要包括以下内容:(1)从甘肃天水发电厂附近采集的微酸性水样进行平板分离并在培养基中通入含有20%CO2进行筛选,得到了两株具备烟道气C02固定耦连微藻油脂生产潜能的藻株,经形态及分子生物学鉴定均为小球藻,命名为Chlorella pyrenoidosa XJO1和Chlorella sorokiniana XJ02(XJO1Genbank18S rRNA和ITS-2的登录号为KC416209和KC416206, XJ02的分别为KC416208和KC416207)。在通20%CO2复筛条件下,藻株XJ01和XJ02的生物量为1.81g/L和1.52g/L,油脂含量为31.5%和40.13%,二氧化碳固定效率为0.28g/L/d和0.24g/L/d。对两株株藻细胞中油脂脂肪酸组成进行分析发现,藻株XJ01和XJ02细胞中油脂都主要由C16和C18的饱和和不饱和脂肪酸组成,适于优质生物柴油的生产。(2)以苏丹黑B为染料,藻株XJ01和XJ02为研究对象,建立并优化了苏丹黑B染色检测微藻细胞中油脂累积的方法,利用此方法检测两株藻细胞内油脂含量。结果表明,两株藻细胞内油脂含量在生长对数期中期开始快速增加,到生长稳定期时达到最高,随后开始缓慢降低,且通高浓度CO2(20%)有助于微藻细胞内油脂累积,此结果与利用苏丹黑B将微藻细胞染色后在显微镜下观察到的胞内油滴累积结果基本相符。(3)探究了氮源浓度对藻株XJ01和XJ02细胞生长、细胞内油脂含量的影响情况。结果表明,在微藻培养前期,相对较低的氮源浓度对藻细胞的生长更有利,而就整体生长而言,相对较低的氮源浓度影响微藻生物量的获得,但利于微藻胞内油脂的积累;在较低氮源浓度并通20%CO2条件下,藻株XJ01和XJ02油脂含量可达到49%和60%。
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