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背景胰腺癌恶性程度高、易早期浸润、转移,5年生存率<3%。大部分病人在确诊时癌肿已属晚期,并侵袭或转移到胰外器官而无法根治切除。目前化疗仍是晚期胰腺癌常规治疗的主要手段,但随着肿瘤细胞对化疗药物耐药性的不断增强而使疗效逐渐降低。因此,寻求新的有效的治疗手段是基础研究工作者和临床医生共同努力的方向。5-氟尿嘧啶(5-Fu)是最早用于胰腺癌的化疗药物,同样,因为肿瘤细胞的耐药性使其疗效显著降低。近年,诸多的研究表明,肿瘤细胞对5-Fu耐药的原因是与细胞内的胸甘酸合成酶(thymidylate synthase , TS)的表达升高有关。2-氨基二环(2, 2)庚二羧酸[2-aminobicyclo-(2,2,1)-heptane-2-carboxylic acid,BCH]是L氨基酸转运载体1(LAT1)的特异性的抑制剂。LAT1主要转运含有支链和苯环侧链大分子中性氨基酸,其中包括合成TS的重要原料苯丙氨酸。研究表明,LAT1在各种增生组织、肿瘤细胞系以及人类肿瘤组织中表达量增高,对恶性肿瘤的不断增殖起着重要的作用;目前对LAT1的研究涉及生命科学诸多方面,包括肿瘤的诊断、治疗、转移和预后等。为探讨BCH联合5-Fu对胰腺癌SW-1990细胞增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制,我们进行了相关的研究。目的研究BCH联合5-Fu对人胰腺癌SW-1990细胞增殖和凋亡的影响,初步探讨其作用机制,为胰腺癌的治疗提供理论依据。方法体外培养胰腺癌SW-1990细胞。①MTT法分别测定不同浓度5-Fu及BCH对胰腺癌细胞增殖的影响,筛选细胞最适抑制的药物浓度;②Western blot分别检测胰腺癌细胞在加入最适浓度的5-Fu后TS及LAT1蛋白表达情况;Western blot检测胰腺癌细胞在加入最适浓度的BCH及5-Fu联合BCH后TS及LAT1蛋白表达情况。③[3H]L-苯丙氨酸摄取试验观察不同浓度BCH对胰腺癌细胞摄取氨基酸的影响;④流式细胞仪(FCM)检测5-Fu、BCH及BCH联合5-Fu对胰腺癌细胞的早期凋亡率;⑤采用SPSS17.0软件进行统计分析。结果①MTT检测显示,在一定浓度范围内随着浓度的增加,5-Fu对细胞的增殖抑制作用逐渐增强;随着作用时间延长,5-Fu对细胞的增殖抑制作用改变不明显,最适浓度40mg/L。BCH随着浓度的增加抑制作用逐渐增强,结果呈浓度依赖性,最适浓度为20 mmol/L;随着作用时间延长BCH对细胞的抑制也逐渐增强,结果呈时间依赖性;②选择40mg/L的5-Fu,Western blot检测显示,随着时间的延长,肿瘤细胞内TS表达呈升高趋势,LAT1蛋白表达轻微下降趋势;联合20 mmol/L的BCH后,Western blot检测显示SW-1990细胞内的TS蛋白表达下调明显。③氨基酸摄取实验显示BCH浓度在0-30μmol/L时对细胞摄取[3H]L-苯丙氨酸的抑制作用不明显,P>0.05;浓度在30μmol/L以上抑制作用显著,特别是3000μmol/L BCH对SW-1990细胞摄取[3H]L-苯丙氨酸产生完全的抑制,P<0.01,半数抑制率(IC50)= 74.20±4.50μmol/L ;④FCM检测结果表明,对照组的SW-1990细胞早期凋亡率为(1.94±0.50)%,在20 mmol/L的BCH处理48h后,SW-1990细胞的早期凋亡率(13.36±1.79)%,在40mg/L的5-Fu处理48h后,SW-1990细胞的早期凋亡率(20.48±1.88)%;相同的药物浓度联合处理48h后,SW-1990细胞的早期凋亡率(50.48±1.82)%。结论BCH联合5-Fu可增加5-Fu对胰腺癌SW-1990细胞的细胞毒性;BCH通过抑制胰腺癌SW-1990细胞LAT1及TS蛋白表达而实现增殖抑制和诱导凋亡作用。