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骨形态发生蛋白9(Bone morphogenetic protein 9,BMP-9)已被鉴定为在各种组织中调节细胞的增殖,凋亡和分化。然而,其在人卵母细胞成熟调节网络中的作用及其与卵泡刺激素(Follicle stimulation hormone,FSH)的关系仍然知之甚少。在这里,我们探讨了BMP-9对体外人卵巢黄体化颗粒细胞增殖的影响,并研究了BMP-9对FSH诱导的颗粒细胞增殖和类固醇激素合成影响的潜在机制。通过CCK-8试剂和EdU分析观察BMP-9对颗粒细胞增殖作用。利用RT-PCR及Westernblot技术测定FSH在颗粒细胞BMP-9刺激下诱导的相关mRNA,蛋白质水平。CCK-8结果显示,培养基中加入BMP-9上调颗粒细胞增殖,并表现剂量100 ng/ml(3.52±0.17倍,P<0.05)和时间依赖性48小时(0.20±0.11,0.46±0.10,P<0.05)。BMP-9与FSH联合培养组EdU标记细胞比例大于FSH单独培养组(3±0.82,5±0.67,P<0.01)。此外,与观察到的CCK-8细胞活力趋势和EdU测定一致,BMP-9以剂量依赖性方式增加PCNA的mRNA水平(P<0.05),并且增加FSH诱导的PCNA mRNA的表达。与FSH组相比,Westernblot结果显示BMP-9联合FSH培养组中,FSHR蛋白水平显着升高(2±0.02,2.7±0.13,P<0.01);PKA蛋白水平均下降(6±0.17,4±0.06,P<0.05);Ras(2.2±0.11,3±0.10,P<0.01)和Raf蛋白水平(1.9±0.09,2.6±0.16,P<0.01)及ERK1/2的磷酸化显着增加(1.9±0.05,3±0.08,P<0.05)。在利用抑制剂阻滞颗粒细胞中FSHR,PKA,ERK蛋白表达和cAMP合成后,观察到PCNA,StAR,3β-HSD和P450arom蛋白水平出现相应变化。本研究的结果表明,BMP-9促进基础与FSH诱导的,与PCNA蛋白表达相关的人卵巢颗粒细胞增殖。此外,BMP-9可能是通过影响FSH诱导的FSHR,及其cAMP/PKA和MAPK信号传导途径来调节颗粒细胞增殖与类固醇的合成。