红薯叶多酚的溶剂提取、消化性及体内降血脂作用研究

来源 :南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xuxinhuiaishu
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红薯叶是红薯生产的主要副产物,在世界许多国家和地区被当作一种新型的绿色蔬菜食用。研究表明,红薯叶中含有丰富的多酚类化合物,且其提取物具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等活性。本课题组前期对红薯叶中的多酚类化合物及其抗氧化和降血糖活性进行了大量研究,并率先将动态高压微射流技术(DHPM)应用于红薯叶多酚的提取,发现DHPM辅助提取能显著提高红薯叶多酚的提取得率及提取物的抗氧化活性。然而,对红薯叶DHPM提取物的一些重要的功能性质如体外消化性、降血脂尚未进行深入研究,且这些问题还亟待探索。针对以上科学问题,本论文在前期研究基础上,继续以红心(橘色肉型)红薯叶为原料,系统研究了红薯叶多酚的溶剂提取、消化性以及体内降血脂活性,旨在为红薯叶资源的高效开发利用提供理论依据,同时为促进DHPM技术在天然产物的研究与开发领域中的应用奠定基础。主要研究内容和结论如下:(1)以十种不同的溶剂从红薯叶中提取多酚类化合物,并研究了提取物中总酚、总黄酮、花青素含量及其抗氧化活性,最后运用高效液相色谱-串联质谱技术(HPLC-MS/MS)鉴定红薯叶提取物的主要抗氧化成分组成。结果发现:提取溶剂的极性对红薯叶中酚类物质的提取以及提取物的抗氧化活性具有显著性影响。50%丙酮提取物具有最高的粗提物得率(33.43%)、总酚含量(43.82 mg CAE/g DM)和体外抗氧化活性(DPPH·清除能力(36.59 mg VcE/g DM))、还原能力(OD700=0.81,质量浓度为1.2 mg DM/mL时)、HO·清除能力(27.80 mg VcE/g DM),而70%乙醇对黄酮的提取效率最高,总酚含量与体外抗氧化活性具有较好的相关性,与DPPH·清除能力、还原力和HO·清除能力的相关性系数分别为0.9430、0.9460和0.6444。从50%丙酮提取物中共鉴定或初步鉴定了14种酚类化合物,其中绿原酸以及槲皮素衍生物是红薯叶中主要的酚类化合物。(2)建立了高效液相色谱同时测定红薯叶中5种酚酸(绿原酸、咖啡酸、3,4-diCQA、3,5-diCQA和4,5-diCQA)和1种黄酮(异槲皮苷)的方法,并用于测定江西4个不同产地(吉安、南昌、宜春和丰城)红心红薯叶中5种酚酸和1种黄酮的含量。结果表明,采用HPLC测定的最优色谱条件为:色谱柱为ZORBAX SB-C18(4.6×250 mm,5μm),流动相B为乙腈,流动相A为0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱方式为:012 min,10%→25%B;1225 min,25%B;2530 min,30%→40%B,流速为0.8 mL/min,5种酚酸的检测波长为326 nm,异槲皮苷的检测波长为355 nm。绿原酸、咖啡酸、3,4-diCQA、3,5-diCQA、4,5-diCQA和异槲皮苷的线性范围分别为0.550.0μg/mL、0.525.0μg/mL、5.0100.0μg/mL、10.0200.0μg/mL、5.0100.0μg/mL和0.550.0μg/mL,线性度良好,加标回收率分别为99.34%、101.50%、102.68%、97.50%、96.90%和96.14%。该方法分析时间短、分离度高,适用于红薯叶中5种酚酸和1种黄酮含量的测定。采用建立的HPLC方法分析发现,在4个产地的红薯叶资源中,江西南昌生产的红薯叶具有较高的多酚含量。(3)研究体外模拟胃肠道消化对红薯叶多酚的稳定性及抗氧化活性的影响。结果发现红薯叶多酚在胃消化阶段较稳定,而小肠消化阶段不稳定,发生了一定的降解。常规溶剂提取物与DHPM提取物中红薯叶多酚的生物利用率分别为16.24%和13.36%,表明只有极小的一部分红薯叶多酚被小肠吸收。DHPM辅助提取能够提高红薯叶多酚的提取得率,但没有提高红薯叶多酚的生物利用率。红薯叶多酚的抗氧化活性在体外模拟胃消化过程中无明显变化,而在模拟小肠消化吸收阶段显著提高(p<0.05),pH的改变和降解产物的生成可能是模拟小肠消化吸收阶段红薯叶多酚抗氧化活性增强的原因,但其影响机理仍需进一步研究。(4)建立小鼠预防高血脂模型研究红薯叶DHPM提取物的体内降血脂作用。结果发现:ICR小鼠用高脂饲料喂养50天后,小鼠血清中的TC值与LDL-C值均显著高于正常组小鼠,小鼠的肝指数也显著增加,肝脏外观呈泛黄而肥大,而体重增重与正常组却没有显著性差异。灌食红薯叶DHPM提取物能够降低高脂饮食小鼠血清的TC和LDL-C含量,但效果不显著。肝脏外观和切片显示灌食中剂量(300 mg CAE/kg BW.d)、低剂量(150 mg CAE/kg BW.d)的红薯叶DHPM提取物不能有效改善肝脏功能,而当灌食高剂量(600 mg CAE/kg BW.d)的DHPM提取物后,小鼠肝功能得以改善。
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