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Mx基因是Lindenmann等在研究A2G小鼠对流感病毒具有天然抵抗力这一现象时发现的。Mx基因从小鼠16号染色体上单一显性等位基因遗传获得,因能抵抗黏液病毒而命名为基因即抗黏液病毒基因。Mx基因表达Mx蛋白,是由Ⅰ型干扰素(IFNα/β)诱导宿主细胞所产生的抗病毒蛋白中的一种。禽类的Mx蛋白具有抵抗禽流感病毒及水疱性口炎病毒(VSV)的功能,Mx蛋白在大多数脊椎动物中存在,如哺乳动物、鱼类、家禽。由于禽类是禽流感的自然宿主,因此对禽类Mx蛋白基因进行研究具有重要意义。
本研究以山东省地方良种琅琊鸡作为试验动物,采用RFL分析方法检测了琅琊鸡Mx基因3端部分序列的多态性。并运用广义线性模型(GLM)方法分析了基因变异与琅琊鸡的生产性状、组织差异表达的关系,初步探索了此基因变异对表型性状的影响。
结果显示:
1、运用PCR法从琅琊鸡血液中克隆了Mx基因3端部分序列,长357bp,提交Genbank,获登陆号GU576873;运用RFLP方法对其进行遗传多态性研究,该扩增产物经HaeⅢ酶切后,出现AA、AB两种基因型,其基因型频率在琅琊鸡Ⅰ群体中分别是16.7%和83.3%,在琅琊鸡Ⅱ群体中分别是12.40%和87.60%。经x2检验,琅琊鸡Ⅰ群体(x2=28.42,P<0.01)、琅琊鸡Ⅱ群体(x2=75.98,P<0.01)在该位点上均未处于Hardy-Weinberg平衡状态。
2、分析琅琊鸡Ⅰ群体Mx基因型与生产性状指标的相关性时发现:AB型个体的活体重、屠体重、半净膛重、全净膛重、胸腺重显著大于AA基因型个体(P<0.05);AB型个体的法氏囊重极显著大于AA基因型个体(P<0.01);基因型与生长性状、体型指数相关性不明显。
3、提取琅琊鸡Ⅰ群体胸腺、脾脏、法氏囊总RNA并进行Mx基因相对定量表达检测,研究发现,各组织中的表达量关系为:脾脏>法氏囊>胸腺,其中脾脏相对表达水平极显著高于法氏囊(P<0.01),显著高于胸腺(P<0.05);在法氏囊表达水平极显著高于胸腺(P<0.01),胸腺内表达水平最低;个体间Mx基因表达量在三种组织中的差异变异处于中等变异水平(批间变异系数CV%为4.07-7.12)。