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背景与目的：1-磷酸鞘氨醇（Sphingosine-1-Phosphate, S1P）是鞘磷脂代谢的中间产物之一。对动脉粥样硬化等心血管疾病中的发生和发展起着重要的作用。是目前颇受关注的脂质信号分子，是溶血磷脂的中间代谢物，广泛存在于血液、淋巴液、红细胞、中性粒细胞、血小板等体液和细胞中，在体内具有众多生物学作用。S1P的这些作用，或通过其本身直接产生细胞内效应，或通过其特异性受体影响细胞内信号转导途径产生作用。S1P受体（S1PR）属于G蛋白偶联受体家族成员，目前人们已经发现了它的5种亚型，即S1PR1-5。S1PR1主要与Gi偶联，不同的G蛋白介导了细胞内不同的信号转导途径，产生不同的生物学效应，因此，S1P与其不同亚型受体作用可以激活不同的信号转导途径，产生各种各样的生物学效应。但有关S1PR1对巨噬细胞内胆固醇代谢的影响未见报道。因此，本论文主要探讨S1PR1参与HDL介导的THP-1源性巨噬细胞胆固醇流出及其机制，为全面了解S1PR1的抗动脉粥样硬化机制提供新的理论基础。方法：1.佛波酯(Phorbol-12-myristate-13-acetate, PMA)诱导THP-1单核细胞24h后，选择不同时间和浓度的oxLDL进行处理，人胆固醇Elisa试剂盒检测细胞培养液中胆固醇含量。2.分别用50μg/ml HDL、VPC23019(S1PR1抑制剂，10μM)，孵育THP-1源性巨噬细胞12h，然后加BODIPY-Cholesterol孵育过夜，高效液相色谱仪检测细胞内胆固醇含量变化，同时加50μg/ml HDL共孵育，以5μΜ BODIPY荧光标记胆固醇细胞内脂质蓄积变化。3. VPC23019(10μM)、siRNA处理THP-1源性巨噬细胞24h后，Western Blot检测ABCA1对蛋白表达情况。4.分别用S1P、VPC23019（S1PR1抑制剂）、LY294002（PI3K抑制剂）和MK2206（Akt抑制剂）来检测S1PR1-PI3K-Akt信号通路对LXRα表达的影响。5. T0901317(LXR激动剂)、LY294002（PI3K抑制剂）、MK2206（Akt抑制剂）和22S-HC（LXR抑制剂）来观察S1PR1-PI3K-Akt-LXRα信号通路对ABCA1的表达影响。6. S1P、siRNA和VPC23019（S1PR1抑制剂）处理THP-1源性巨噬细胞检测S1P/S1PR1对Akt磷酸化的影响。7.用oxLDL处理后THP-1源性巨噬细胞分别加入：S1P、VPC23019（S1PR1抑制剂）、T0901317（LXRα激动剂）和22S-HC（LXRα选择性抑制剂）检测S1PR1和LXRα对细胞内胆固醇蓄积的影响。结果：1.60μg/ml oxLDL处理THP-1源性巨噬细胞24h，培养液中胆固醇含量达到最高。2. THP-1源性巨噬细胞胆固醇大部分位于细胞胞膜上，HDL可降低THP-1源性巨噬细胞内胆固醇含量；与HDL对照组相比，S1PR1抑制剂VPC23019使THP-1源性巨噬细胞内总胆固醇和胆固醇酯含量显著提高，而BODIPY荧光检测结果示：VPC23019能明显降低介导的细胞内胆固醇的流出，表明S1PR1对S1P介导的THP-1源性巨噬细胞胆固醇流出产生影响。3. S1PR1受体抑制剂VPC23019和siRNA均能显著降低HDL诱导的ABCA1的蛋白表达水平。4. S1P、VPC23019、LY294002和MK2206均能不同程度下调LXRα的蛋白表达水平和mRNA表达水平而S1P确能显著上调LXRα的蛋白和mRNA表达。5. S1PR天然配基S1P和T090131（7LXRα激动剂）能显著增加ABCA1的蛋白和mRNA表达水平，而LY294002(PI3K抑制剂)，MK2206（Akt抑制剂）和22S-HC（LXRα选择性抑制剂）能显著减低ABCA1的蛋白和mRNA表达水平。6. S1P增加磷酸化Akt水平，而VPC23019和siRNA则使磷酸化Akt水平降低。7. S1P和T0901317（LXRα激动剂）能显著减少THP-1源性巨噬细胞内总胆固醇和胆固醇酯的含量，VPC23019（S1PR1抑制剂）和22S-HC（LXRα选择性抑制剂）能显著增加THP-1源性巨噬细胞内总胆固醇和胆固醇酯的含量。结论:1. S1PR1参与HDL介导的THP-1源性巨噬细胞胆固醇流出。2. S1PR1通过PI3K-Akt-LXR信号转导通路促进THP-1源性巨噬细胞胆固醇流出。