治疗奶牛乳房炎的抗菌蒙兽药成分及其复方的筛选和抑菌机理的研究

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奶牛乳房炎(dairy cow mastitis)是奶牛的一种常见且多发的疾病,该病是造成我国奶牛业经济损失的最直接及最主要的原因之一。奶牛乳房炎是由病原微生物感染而引起乳房组织及乳头发炎的一种疾病,直接导致产奶量减少,质量下降。抗生素早已成为治疗乳腺炎的首选药物,由于长期使用,耐药菌株频繁出现,以及抗生素残留现象,严重危害着人畜健康。因此,应该把目标转移到更经济、有效、绿色的治疗和预防上。蒙药是纯天然的药物,其中具有多种生物有效成分,其作用特点为抗菌、消炎、低毒、低残留、无副作用等。因此,治疗期无需弃奶。在前期研究中,蒙药复方特润舒都乐等治疗奶牛乳房炎具有抑菌抗炎免疫作用而疗效显著。为了得到该复方的诸多成分中的有效抗菌成分及其最佳体内外抗菌复方并揭示其作用机理,特此进行了研究。试验结果如下:1、采用牛津杯法,根据体外抑菌直径从治疗奶牛乳房炎蒙药复方的9种单药中筛选出4种蒙药有效成分,对革兰氏阴性、阳性(大肠杆菌和金黄色葡萄球菌)两种细菌均有抑菌作用,再检测最低抑菌浓度(MIC)、FIC指数后,确定4种药物之间对两种细菌均无拮抗作用,适宜配伍。分别测定每种药物的MIC,没食子酸对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分别为10mg/mL、1.28mg/mL;盐酸小檗碱对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分别为1.875mg/mL、0.32mg/mL;大黄酸对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分别为20mg/mL、1.28mg/mL;大黄素对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分别为20mg/mL、0.5mg/mL;2、根据正交试验设计出对两种细菌有最佳作用的药物组合,针对大肠杆菌4种药物均用药,针对金黄色葡萄球菌,3种药物用药。再次运用正交试验设计,确定各药物之间的剂量配比。剂量配比结果:针对大肠杆菌最佳剂量配比组合为A183C1D1,同理,对金黄色葡萄球菌最佳剂量配比组合为A382C1。3、测定抗菌组方的最低抑菌浓度MIC,抗菌组方1对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC均为0.78mg/mL;抗菌组方2对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC分别为0.14mg/mL、0.55mg/mL;抗菌组方提取1对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC均为0.39mg/mL;抗菌组方提取2对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC分别为0.14mg/mL、0.55mg/mL;盐酸环丙沙星对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC分别为0.00125mg/mL、0.0025mg/mL,通过体内抗菌小鼠保护率测定,抗菌组方提取1效果最好,保护率为62.5%。说明蒙兽药抗菌成分组方虽然体外抗菌远高于阳性对照组,但是,其体内抗菌保护率与盐酸环丙沙星阳性对照组相当。4、通过建立小鼠乳腺炎模型,抗菌组方对小鼠治疗72h后,病变情况基本痊愈。5、为了给优化后的抗菌组方提供进一步的理论依据,试验研究了抗菌组方对两种主要致病菌细胞膜的影响。结果显示,细菌经过抗菌组方处理之后,细胞的内膜通透性增加、电导率增加、碱性磷酸酶(AKP)含量增加。药物通过破坏细菌细胞膜,增加渗透性,进而发挥抗菌作用。
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