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目的:脑梗死的形成,主要是由于脑组织的血流供应中断,导致了该区缺血缺氧,产生一系列级联反应,最终导致脑组织缺血性坏死,但由于溶栓治疗,自通现象,及小血管的侧枝循环重新建立等原因,使脑缺血再灌注机制也参与其中。本实验是通过建立大鼠脑缺血再灌注模型,模拟缺血性级联反应、缺血再灌注损伤最终导致的脑梗死过程,观察乌司他丁对大鼠脑缺血再灌注后的梗死体积影响,以及用药的有效时间窗,深入探讨乌司他丁对脑梗死的临床应用价值。
方法:选取健康雄性SD大鼠28只,全部大鼠使用线栓法制作脑缺血再灌注模型,大脑中动脉闭塞130分钟后进行再灌注,随机分为四组,(1)缺血对照组,7只,模型建立后,第3小时给予大鼠2ml生理盐水腹腔注射。(2)3小时用药组,7只,模型建立后第3小时给予乌司他丁(乌司他丁20万单位/kg)腹腔注射,(3)12小时用药组,7只,模型建立后,第12小时给予乌司他丁(乌司他丁20万单位/kg)腹腔注射,(4)24小时用药组,7只,模型建立后第24小时给予乌司他丁(乌司他丁20万单位/kg)腹腔注射。大鼠清醒后,对大鼠行神经功能评分,采用ZealLonga5分制评分。要求脑缺血再灌注模型建立后评分达到3分,大鼠向对侧倾倒,行走困难。全部大鼠于脑缺血再灌注模型术后,第72h处死,取脑,将脑组织做成2mm切片,放入2%2.3.5-氯化三苯基四氮唑(TTC)溶液中染色,这时正常的脑组织呈红色,而梗死区的脑组织不着色,用支架将数码相机固定并照相。将照片输入Image-ProPlus6.0图像分析软件系统,进行处理计算大鼠脑梗死体积百分比,其计算公式为:梗死面积=对侧正常脑组织半球面积-患侧正常脑组织面积,各脑片梗死面积之和乘以厚度(2mm)为总的梗死体积,最后脑梗死灶体积与全脑体积之比为脑梗死体积百分比[5]。采用SPSS16.0统计软件对数据资料进行分析,使用t检验,所有计量资料均用((x)±s)表示,P<0.05认为有统计学意义。
结果:大鼠脑缺血再灌注后,将各治疗组脑梗死体积百分比与缺血对照组的脑梗死体积百分比进行比较后发现,各治疗组的脑梗死体积均较对照组的脑梗死体积有不同程度缩小,其中3小时用药组脑梗死体积缩小最明显,其中3小时用药组,12小时用药组与对照组比较,具有统计学意义(P<0.05),而24小时用药组与对照组比较,无统计学意义(P>0.05),
结论:大鼠脑缺血再灌注术后12小时内应用乌司他丁可以缩小梗死体积,这一时间内可能为乌司他丁动物实验的有效治疗时间窗,随着研究的不断进展乌司他丁可能在临床治疗上发挥巨大作用。