干姜对寒饮蕴肺证大鼠的影响及组织分布的研究

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目的:验证干姜水煎液对于慢性阻塞性肺疾病寒饮蕴肺证的治疗作用,阐明干姜治疗此病症之物质基础,通过研究干姜指标成分在慢阻肺寒饮蕴肺证大鼠体内代谢分布,探讨其归经。方法:将Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、阳性治疗组、干姜高剂量治疗组、干姜中剂量治疗组、干姜低剂量治疗组。造模第1、14天,各造模组大鼠(空白组除外),给予鼻腔滴注LPS200μL/只,第2-30天(第14天除外),各造模组每天上午8:30置于染毒箱中给与烟熏30min,然后灌服相应剂量的冰水(1ml/100g),其后将各造模组大鼠置于0℃左右的外界环境中给予寒冷刺激一个小时;下午2:30开始造模,将各造模组大鼠置于染毒箱中烟熏30min,其后置于0℃度左右环境中给与寒冷刺激1小时。造模第16天起,各用药组灌服相应剂量的干姜水煎液,阳性给药组给予相应剂量小青龙合剂,至造模结束。记录各组大鼠饮食量、饮水量、体重的变化,测定各组大鼠各主要脏器的脏器系数,测定大鼠的呼吸指标以及测定各大鼠IL-8、IL-10、IL-13、TNF-α、AQP1、Muc5ac的含量,测的数据用SPSS17.0软件处理,探讨干姜对于慢性阻塞性肺疾病寒饮蕴肺证治疗作用。干姜高剂量给药组于大鼠最末一次给药以后5min、10min、20min、30min、40min、60min、90min、120min、240min、360min,各时间点取两只摘眼球取血,进一步验证干姜药效物质基础,应用UV-HPLC检测含药血清和正常血清的HPLC图谱,确定干姜入血的物质。取血后立即处死大鼠,取肝、心、脾、肺、肾、胃、大肠、小肠、脑、膀胱等组织,检测有效物质在各组织中的浓度,所得数据用DAS3.0处理,通过对比干姜有效成分在大鼠脏器中的检测时间、浓度、维持时间等探讨干姜在慢性阻塞性肺疾病寒饮蕴肺证大鼠体内归经。结果:1、中剂量干姜水煎液能够显著改善慢阻肺寒饮蕴肺证大鼠的形态,显著增加用药组大鼠的体重与饮食量、饮水量。显著增加肺脏的脏器系数等,说明干姜具有治疗慢阻肺寒饮蕴肺证的药效。2、药效物质基础的确定:确定干姜入血的有效物质为6-姜酚、6-姜烯酚和8-姜酚。组织分布结果:在给药后的10个时间点,三种药效成分广泛存在与大鼠的肺、脾、肾、肝、心、大肠、胃、小肠等器官中。维持时间的比较结果是6-姜酚为脾>胃>肺=小肠>大肠>膀胱>心>肾>肝>血清=脑,6-姜烯酚为胃>肺>脾>肝=大肠>小肠=膀胱=心=肾>脑>血清,8-姜酚为胃>脾=小肠>肺>大肠>脑=肝>血清>肾>心>膀胱。6-姜酚在组织中的AUC0-t依次为胃>脾>小肠>肾>肺>大肠>心>膀胱,6-姜烯酚在组织中的AUC0-t依次为胃>心>大肠>肺>肾>小肠>脾>肝>膀胱>脑,8-姜酚在组织中的AUC0-t依次为胃>大肠>脾>肝>小肠>血清>脑>肺。结论:干姜药效学实验表明其能够治疗慢性阻塞性肺疾病寒饮蕴肺证,8-姜酚、6-姜烯酚和6-姜酚能够在血清中检测到,且不同浓度的分布在肺、脾、肾、肝、心、胃等器官,从而进一步表明此三成分为干姜药效成分。分析三物质在组织中的最早检测时间、维持时间以及富集浓度等,得出干姜治疗慢阻肺寒饮蕴肺证主要归肺、脾、胃经,和文献资料中所记录的归经情况大致相符。
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